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觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂 一 實(shí)驗(yàn)原理 1 植物根尖 莖尖等分生區(qū)細(xì)胞能進(jìn)行有絲分裂 2 在有絲分裂過(guò)程中 染色體發(fā)生規(guī)律性動(dòng)態(tài)變化 3 染色體可被堿性染料著色 便于觀察 4 根據(jù)顯微鏡下觀察到的染色體特點(diǎn)可識(shí)別有絲分裂不同時(shí)期 觀察根尖的縱切面 分生區(qū) 根冠 伸長(zhǎng)區(qū) 成熟區(qū) 分生組織 保護(hù)組織 根據(jù)細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)分為幾部分 二 材料用具 1 洋蔥 蔥 蒜 2 顯微鏡 載玻片 蓋玻片 剪刀 鑷子 滴管 玻璃皿3 15 鹽酸 95 酒精混和 1 1 作為解離液 0 01g ml或0 02g ml龍膽紫染液4 洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂固定裝片 三 方法步驟 一 洋蔥根尖的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)課前的3 4d 取洋蔥一個(gè) 放在廣口瓶或燒杯上 瓶?jī)?nèi)裝滿清水 放置在光照處 注意每天換水1 2次 使洋蔥的底部總是接觸到水 待根長(zhǎng)到5cm時(shí) 取生長(zhǎng)健壯的根尖制片臨時(shí)裝片觀察 解離 取根尖2 3mm 最好在每天的10 14點(diǎn)取根 因此時(shí)間是洋蔥根尖有絲分裂高峰期 立即放入盛有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15 的氯化氫溶液和體積分?jǐn)?shù)為95 的酒精溶液的混合液 1 1 的玻璃皿中 在室溫下解離3 5min何為解離 目的 是使得細(xì)胞相互分離開(kāi)來(lái) 二 裝片的制作 另外解離時(shí)間不宜過(guò)短 否則根尖未充分解離 壓片時(shí)細(xì)胞分不開(kāi) 細(xì)胞重疊 但又不能太長(zhǎng) 否則使根尖過(guò)分酥軟 無(wú)法進(jìn)行漂洗和染色 且染色體成分被破壞 這一步是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵 也可手拿鑷子 輕輕按正在解離的根尖 感覺(jué)酥軟即可 漂洗用鑷子去除根尖后放入盛有清水的玻璃皿中漂洗10分鐘 思考 目的 需要注意 動(dòng)作輕 不要把根尖弄碎 漂洗的目的是去除根中多余的解離液 特別是鹽酸 因?yàn)槿旧珪r(shí)用的是堿性染料龍膽紫 酸與堿發(fā)生反應(yīng)會(huì)影響染色效果 染色再次輕輕取出漂洗干凈的根尖放入滴有一滴龍膽紫的在載玻片上 染色3 5min染完之后用吸水紙將多余的染液除去 再加一滴請(qǐng)水 過(guò)長(zhǎng)過(guò)短都不好 為什么 深 淺 目的是使染色體著色 染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)過(guò)短都不好 為什么 染色時(shí)間亦不能過(guò)長(zhǎng) 否則會(huì)使染色體與周圍的其他結(jié)構(gòu)均被著色 這樣就無(wú)法形成顏色上的反差 不便于觀察 染色時(shí)間亦不能過(guò)短 否則會(huì)使染色體不能很好著色 實(shí)驗(yàn)步驟 制片 注意 蓋蓋玻片時(shí)要從一側(cè)接觸 慢慢放下 注意不要產(chǎn)生氣泡 壓片時(shí)不要太用力 只要細(xì)胞散開(kāi)既可 觀察 顯微鏡的使用低倍鏡觀察慢慢移動(dòng)裝片找到分生區(qū)細(xì)胞特征 較小 呈正方形 排列緊密 有的正在分裂換高倍鏡觀察用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡調(diào)節(jié)視野清晰找到有絲分裂前 中 后 末期的細(xì)胞 并用鉛筆繪圖 特點(diǎn) 分裂間期 DNA復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成 分裂期 前期中期后期末期注意 染色體的行為變化 根冠 分生區(qū) 伸長(zhǎng)區(qū) 觀察 注意 在一個(gè)視野中處于分裂期的細(xì)胞是少數(shù)的 絕大多數(shù)的細(xì)胞處于 期 為什么 一個(gè)視野中很難找全各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞 可以慢慢移動(dòng)裝片 從臨近的視野中找 根尖培養(yǎng) 解離 剪取根尖的長(zhǎng)度2 3mm立即放入盛有適量解離液的玻璃皿中室溫解離3 5分鐘最佳 酥軟 不能太硬也不能太軟 用鑷子輕輕取出根尖 漂洗 用鑷子取出根尖后放入盛有清水的玻璃皿中漂洗10分鐘需要注意 動(dòng)作輕 不要把根尖弄碎 染色 再次輕輕取出漂洗干凈的根尖放入滴有一滴龍膽紫的載波片中 染色3 5min需要注意 夾取根尖時(shí)一定要注意不要夾根尖頭部 可以?shī)A取根尖的后部 染色的時(shí)間控制 制片 蓋蓋玻片時(shí)要從一側(cè)接觸 慢慢放下 注意不要產(chǎn)生氣泡 壓片時(shí)不要太用力 只要細(xì)胞散開(kāi)既可 利用漂洗的時(shí)間觀察固定裝片 三 方法步驟 1 培養(yǎng)根尖 2 裝片制作 1 解離 2 漂洗 3 染色 4 制片 3 觀察 1 低倍鏡觀察 2 高倍鏡觀察 練習(xí) 1 細(xì)胞周期中 要辨認(rèn)染色體形態(tài)和數(shù)目 應(yīng)選擇 A 間期B 前期C 中期D 后期 C 2 同學(xué)觀察洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂裝片時(shí)發(fā)現(xiàn)被觀察的材料邊緣為淺藍(lán)色 中間為白色 下列有關(guān)對(duì)這一現(xiàn)象的分析 正確的是 A 染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)B 染色時(shí)間過(guò)短C 解離不充分D 漂洗不徹底 B 3 在觀察有絲分裂的實(shí)驗(yàn)中 一般用根尖而不能用洋蔥鱗片葉表皮的原因是 A 洋蔥表皮細(xì)胞因有紫色液泡而使分裂看不清B 洋蔥表皮細(xì)胞太小C 洋蔥表皮細(xì)胞一般不發(fā)生分裂D 根尖細(xì)胞較大且呈正方形 C 4 某同學(xué)在觀察植物細(xì)胞有絲分裂裝片時(shí) 在根尖分生區(qū)只看到各個(gè)分裂時(shí)期的靜態(tài)的細(xì)胞 而看不到細(xì)胞內(nèi)染色體動(dòng)態(tài)變化 原因是A 壓片用力過(guò)大使細(xì)胞死亡B 細(xì)胞分裂速度緩慢 肉眼很難看出其變化過(guò)程C 細(xì)胞已被殺死 本來(lái)就不可能看到動(dòng)態(tài)變化D 所觀察的細(xì)胞不適合 應(yīng)選擇分裂后期的細(xì)胞進(jìn)行定點(diǎn)觀察 C 5 在下列實(shí)驗(yàn)中 必須始終用活細(xì)胞做材料的實(shí)驗(yàn)是 A 在光學(xué)顯微鏡下觀察植物細(xì)胞分裂的過(guò)程B 觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原C 葉綠體色素的提取和分離D 觀察人體口腔上皮細(xì)胞的實(shí)驗(yàn) 用碘染色 B