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1 果酒制作用到的微生物是 其代謝類型為 重要反應 最適溫度為 2 果醋制作用到的微生物是 其代謝類型為 重要反應 最適溫度為 3 果酒 果醋的制作流程挑選葡萄 沖洗 酒精發(fā)酵 醋酸發(fā)酵 果酒果醋4 腐乳制作涉及的主要微生物是 其代謝類型為型 重要反應 5 泡菜制作用到的微生物是 其代謝類型為 重要反應 最適溫度一般為 6 培養(yǎng)基按物理狀態(tài)分為培養(yǎng)基和培養(yǎng)基 按功能分為培養(yǎng)基和培養(yǎng)基 7 常見的兩種接種方法是法和法 酵母菌 異養(yǎng)兼性厭氧型 C6H12O62C2H5OH 2CO2 18 25 醋酸菌 異養(yǎng)需氧型 C2H5OH O2CH3COOH H2O 30 35 榨汁 毛霉 蛋白質(zhì)多肽 氨基酸 異養(yǎng)需氧 乳酸菌 異養(yǎng)厭氧型 C6H12O62C3H6O3 18 20 液體 固體 選擇 鑒別 平板劃線 稀釋涂布平板 8 三種常用的滅菌方法有 1 滅菌 如接種環(huán) 接種針 2 滅菌 如玻璃器皿和金屬用具等 3 滅菌 如培養(yǎng)基等 9 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)過程 土壤取樣 將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上 10 分解纖維素的微生物的分離實驗原理11 果膠酶的作用是將果膠分解成可溶性的 12 酶的活性是指酶催化的能力 酶反應速度用單位時間內(nèi) 單位體積中反應物的或產(chǎn)物的表示 影響酶活性的因素有 和酶的抑制劑等 灼燒 干熱 高壓蒸汽 樣品的稀釋 篩選能生長的微生物菌落 半乳糖醛酸 一定化學反應 減少量 增加量 溫度 pH 13 固定化酶和固定化細胞是利用物理或化學方法將酶或細胞固定在的技術 包括 和物理吸附法 14 植物組織培養(yǎng)技術的原理是細胞的 過程是離體的植物組織或細胞 完整植物體 15 DNA粗提取的原理是DNA在的NaCl溶液中的溶解度不同 在的NaCl溶液中的溶解度最低 16 PCR技術的原理是 需要的條件是模板 原料 耐高溫的TaqDNA聚合酶等 過程是 和 17 蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步 處理 粗分離 純度鑒定 18 植物有效成分的提取方法有法 法和法等 一定空間內(nèi) 包埋法 化學結合法 全能性 愈傷組織 根 芽等 0 14mol L 不同濃度 DNA復制 引物 變性 復性 延伸 樣品 純化 蒸餾 壓榨 萃取 1 2015 全國新課標 卷 已知微生物A可以產(chǎn)生油脂 微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶 脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn) 回答有關問題 1 顯微觀察時 微生物A菌體中的油脂通?？捎?染色 微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā) 可選用 填 萃取法 或 水蒸氣蒸餾法 從菌體中提取 2 為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落 可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣 并應選用以 為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng) 3 若要測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù) 可在顯微鏡下用 直接計數(shù) 若要測定其活菌數(shù)量 可選用 法進行計數(shù) 4 為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度 某同學測得相同時間內(nèi) 在35 40 45 溫度下降解10g油脂所需酶量依次為4mg 1mg 6mg 則上述三個溫度中 條件下該酶活力最小 為了進一步確定該酶的最適溫度 應圍繞 設計后續(xù)實驗 答案 1 蘇丹 或蘇丹 萃取法 2 油脂 3 血細胞計數(shù)板稀釋涂布平板 4 4540 解析 本題考查了脂肪鑒定 生物有效成分提取 微生物的選擇培養(yǎng) 微生物觀察計數(shù)等知識 意在考查考生對所學知識的理解掌握與綜合運用能力 1 觀察脂肪時可用蘇丹 或蘇丹 染色 對于不易揮發(fā)的物質(zhì)可用萃取法提取 2 為從自然界獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落 應以油脂為唯一碳源進行選擇培養(yǎng) 3 若要測定微生物菌體數(shù) 可在顯微鏡下利用血細胞計數(shù)板直接計數(shù) 若要測定其活菌數(shù)量 可用稀釋涂布平板法獲得單菌落 選擇菌落數(shù)在30 300的平板進行計數(shù) 4 相同時間降解相等質(zhì)量油脂所需酶量越多的溫度條件下酶的活力越小 即45 條件下酶的活力最小 而40 條件下酶的活力相對最大 故應圍繞此溫度設計后續(xù)實驗 以進一步確定該酶的最適溫度 2 2015 全國新課標 卷 回答與胡蘿卜素有關的問題 1 胡蘿卜含有的胡蘿卜素中 最主要的是 填 胡蘿卜素 胡蘿卜素 或 胡蘿卜素 該胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉變成兩分子 后者缺乏會引起人在弱光下視物不清的病癥 該病疾稱為 胡蘿卜素是 填 揮發(fā)性 或 非揮發(fā)性 物質(zhì) 2 工業(yè)生產(chǎn)上 用養(yǎng)殖的巖藻作為原料提取胡蘿卜素時 填 需要 或 不需要 將新鮮的巖藻干燥 3 現(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑 應選用其中的 作為胡蘿卜素的萃取劑 不選用另外一種的理由是 答案 1 胡蘿卜素維生素A夜盲癥非揮發(fā)性 2 需要 3 乙酸乙酯萃取胡蘿卜素的有機溶劑應不與水混溶 而乙醇屬于水溶性有機溶劑 解析 1 從胡蘿卜中提取出的橘黃色物質(zhì)包括多種結構類似物 統(tǒng)稱為胡蘿卜素 胡蘿卜素是其中最主要的組成成分 一分子的 胡蘿卜素在人或動物的小腸 肝臟等器官被氧化成兩分子的維生素A 維生素A缺乏會引起夜盲癥 幼兒生長發(fā)育不良 干皮癥等 其中人在弱光下視物不清的疾病稱為夜盲癥 胡蘿卜素化學性質(zhì)比較穩(wěn)定 不具有揮發(fā)性 2 含水量會影響萃取的效率 因此用養(yǎng)殖的巖藻作為原料提取胡蘿卜素時 需要將新鮮的巖藻干燥 3 有機溶劑分為水溶性和水不溶性兩種 萃取胡蘿卜素的有機溶劑應該具有較高的沸點 能夠充分溶解胡蘿卜素 并且不與水混溶 而乙醇是水溶性有機溶劑 乙酸乙酯是水不溶性有機溶劑 因此應選擇乙酸乙酯作為胡蘿卜素的萃取劑 3 2014 全國新課標 卷 植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解 回答下列問題 1 分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶 該酶是由3種組分組成的復合酶 其中的葡萄糖苷酶可將 分解成 2 在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅 CR 時 CR可與纖維素形成 色復合物 用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時 培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的 3 為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落 某同學設計了甲 乙兩種培養(yǎng)基 成分見下表 注 表示有 表示無 據(jù)表判斷 培養(yǎng)基甲 填 能 或 不能 用于分離和鑒別纖維素分解菌 原因是 培養(yǎng)基乙 填 能 或 不能 用于分離和鑒別纖維素分解菌 原因是 答案 1 纖維二糖葡萄糖 2 紅透明圈 3 不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素 不會形成CR纖維素紅色復合物 即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 解析 1 纖維素酶是一種復合酶 一般認為它至少包括三種組分 C1酶 Cx酶和葡萄糖苷酶 前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖 葡萄糖苷酶將纖維二糖分解成葡萄糖 2 剛果紅可與纖維素形成紅色復合物 但并不與水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應 用含有剛果紅的纖維素培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時 由于纖維素被分解 紅色復合物無法形成 培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈 3 培養(yǎng)基甲未使用瓊脂 為液體培養(yǎng)基 不能用于分離單菌落 含有纖維素和剛果紅 CR 的培養(yǎng)基可分離和鑒別纖維素分解菌 4 2014 海南卷 已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時間有關 為了測定不同泡制天數(shù)泡菜中亞硝酸鹽的含量 某同學設計了一個實驗 實驗材料 試劑及用具包括 刻度移液管 比色管 不同濃度的亞硝酸鈉標準溶液 亞硝酸鹽的顯色劑 不同泡制天數(shù)的泡菜液等 回答相關問題 1 請完善下列實驗步驟 標準管的制備 用和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標準管 樣品管的制備 用刻度移液管分別吸取一定量的 加到不同比色管中 然后在各個比色管中加入等量的顯色劑進行顯色 得到樣品管 將每個分別與系列標準管進行比較 找出與樣品管顏色深淺的標準管 該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量 記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量 2 下圖表示的是泡菜中趨勢 3 泡菜制作過程中產(chǎn)酸細菌主要是 填 醋酸桿菌 或 乳酸菌 答案 1 亞硝酸鈉標準溶液 不同泡制天數(shù)的泡菜濾液 樣品管最相近 2 亞硝酸鹽含量隨泡制時間的變化 3 乳酸菌 解析 1 在亞硝酸鹽的含量測定中 要用不同濃度亞硝酸鈉標準溶液和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標準管 用刻度移液管分別吸取一定量的不同泡制天數(shù)的泡菜濾液 加到不同的比色管中 然后在各個比色管中加入等量的顯色劑進行顯色 得到樣品管 將每個樣品管分別于系列標準管進行比較 找出與樣品管顏色深淺相近的標準管 該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中亞硝酸鹽的含量 記錄各個樣品管亞硝酸鹽的含量 2 據(jù)圖可知 表示的是泡菜中亞硝酸鹽的含量隨發(fā)酵時間的變化曲線 可以表示泡菜中亞硝酸鹽含量的變化趨勢 3 泡菜發(fā)酵時的微生物是乳酸菌 本講主要考查微生物的培養(yǎng) 涉及微生物的計數(shù) 分離和純化培養(yǎng) 并結合發(fā)酵食品制作過程考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術原理及基本操作 在實際生產(chǎn)和生活中 結合酶的特性以實驗探究與分析的形式考查酶的應用 在植物組織培養(yǎng)方面也會聯(lián)系人們生活與健康 在生物組織中特定成分提取與鑒定方面進行命題 命題大部分以非選擇題形式出現(xiàn) 1 方法與原理 2 果酒 果醋 腐乳 泡菜制作中所用菌種及控制條件的比較 果酒和果醋發(fā)酵裝置的設計思路 1 酵母菌繁殖需要氧氣 醋酸菌是好氧細菌 則果酒制作前期和果醋制作整個過程都需要氧氣 酵母菌產(chǎn)生酒精過程是厭氧的 則在發(fā)酵罐充氣口應該設置開關 2 發(fā)酵過程中產(chǎn)生二氧化碳 需要設置排氣口 為了防止空氣中微生物污染 排氣口應該連接一個長而彎曲的膠管 3 為了便于取樣并及時監(jiān)測發(fā)酵情況 需要設置出料口 例1 2014 合肥調(diào)考 下圖是制作果酒和果醋的流程和某同學設計的相關發(fā)酵裝置 請據(jù)圖回答下列問題 1 為提高葡萄出汁率并使果汁澄清 可以加入果膠酶 使用酶時為節(jié)省成本 除控制好pH 溫度等環(huán)境條件外 還應掌握好 2 沖洗后榨汁前還要 3 利用圖乙所示裝置發(fā)酵 將葡萄汁加入發(fā)酵瓶要注意 目的是 生產(chǎn)果酒的整個過程中如何控制充氣口 為提高酒精產(chǎn)量 可在葡萄汁中加入葡萄糖 但濃度不宜過高 原因是 4 制好的果酒一段時間后變酸了 原因可能是將酒精氧化為乙醛后再轉化成了醋酸 醋酸發(fā)酵的適宜溫度為 答案 1 酶用量 2 除去枝梗 3 留約1 3空間防止發(fā)酵液溢出先打開一段時間后關閉濃度過高會導致酵母菌失水死亡 4 醋酸菌30 35 解析 1 影響酶活性的因素主要是pH 溫度 為節(jié)省成本 還應掌握好酶用量 2 沖洗時為防止葡萄破損后微生物從破口處進去 應連同枝梗一起沖洗 榨汁前再除去枝梗 3 將葡萄汁加入發(fā)酵瓶內(nèi)要注意留約1 3空間 以防止發(fā)酵液溢出 生產(chǎn)果酒時先通入一段時間空氣讓酵母菌有氧吸用于自身繁殖 而后關閉充氣口讓其無氧呼吸進行酒精酵 因細胞呼吸的底物是葡萄糖 但葡萄糖濃度過高時會致酵母菌失水死亡 4 果酒變酸是醋酸菌活動的結果 醋酸菌活動的最適溫是30 35 設計發(fā)酵裝置需要注意的問題 1 在酒精發(fā)酵過程中 每隔一段時間擰松瓶蓋或打開排氣口 其原因是在發(fā)酵過程中會產(chǎn)生CO2 防止瓶內(nèi)氣壓過高引起爆裂 2 在醋酸發(fā)酵過程中 需要注意的是要持續(xù)向發(fā)酵液中補充氧氣 3 在裝置中 充氣口的作用是在醋酸發(fā)酵中補充氧氣 排氣口的作用是在發(fā)酵中排出CO2或殘余氣體 出料口的作用是便于取樣檢查和放出發(fā)酵液 排氣口膠管長而彎曲的作用是防止空氣中雜菌感染 變式1 2014 江蘇常熟質(zhì)檢 農(nóng)村中泡菜的制作方法 將新鮮的蔬菜經(jīng)過整理 清潔后 放入徹底清洗并用白酒擦拭過的泡菜壇中 然后加入鹽水 香料及一些 陳泡菜水 密封后置于陰涼處 最適環(huán)境溫度為28 30 有時制作的泡菜會 咸而不酸 或 酸而不咸 前者是用鹽過多 后者用鹽過少 1 用白酒擦拭泡菜壇的目的是 2 菜壇要密封的原因是 若菜壇有裂縫 可能會出現(xiàn)的結果是 3 若制作的泡菜 咸而不酸 最可能的原因是 4 加入一些 陳泡菜水 的作用是 5 制作泡菜的過程中 有機物的干重如何變化 菜壇內(nèi)有機物的種類如何變化 答案 1 消毒 2 乳酸菌為厭氧微生物 密封后造成缺氧環(huán)境將導致乳酸菌不能正常生長 而一些雜菌大量繁殖 泡菜會變質(zhì) 3 鹽過多 抑制了乳酸菌的發(fā)酵 4 提供乳酸菌菌種 5 有機物的干重減少 種類增加 解析 泡菜制作是應用了乳酸菌的發(fā)酵原理 提供的新鮮蔬菜是它的培養(yǎng)基 乳酸菌是厭氧微生物 在缺氧的環(huán)境條件下發(fā)酵可產(chǎn)生大量乳酸 能抑制其他厭氧菌的生存 在有氧情況下 自身受抑制 不能進行乳酸發(fā)酵 使需氧菌繁殖而變質(zhì) 乳酸菌生長繁殖需要消耗有機物 發(fā)酵過程中乳酸菌將一些大分子物質(zhì)如蛋白質(zhì) 脂肪 糖類分別分解成小分子的氨基酸 甘油 脂肪酸 葡萄糖等 因此 泡菜壇內(nèi)有機物的種類增多 干重減少 1 培養(yǎng)基的種類 1 加入培養(yǎng)基中的凝固劑 如瓊脂 一般不能被微生物利用 只能起到凝固作用 2 選擇培養(yǎng)基一般只生長具有特定目的的微生物 鑒別培養(yǎng)基可以存在其他微生物 而且能鑒別特定的微生物 3 基本營養(yǎng)要素 各種培養(yǎng)基一般都含有水 碳源 氮源 無機鹽 此外還要滿足不同微生物生長對pH 特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求 2 方法與原理 1 兩種接種方法作用不完全相同 平板劃線法和稀釋涂布平板法都能使細菌純化 但平板劃線法不易分離出單個菌落 不能計數(shù) 稀釋涂布平板法能使單菌落分離 便于計數(shù) 2 稀釋涂布平板法的缺點 稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中菌落的數(shù)目往往比實際數(shù)目低 這是因為當兩個或多個細胞連在一起時 平板上觀察到的只是一個菌落 3 平板劃線法純化大腸桿菌時不同階段灼燒接種環(huán)的目的不同 第一次操作 殺死接種環(huán)上原有的微生物 每次劃線之前 殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種 使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端 劃線結束后 殺死接種環(huán)上殘存的菌種 避免細菌污染環(huán)境和感染操作者 例2 2014 湖北重點高中聯(lián)考 微生物的分離 培養(yǎng)和計數(shù)是現(xiàn)代生物工程應用中的重要環(huán)節(jié) 如圖為大腸桿菌分離和培養(yǎng)過程中部分操作示意圖 請分析回答下列問題 1 實驗過程中對培養(yǎng)基 培養(yǎng)皿 實驗操作者的雙手所采用的滅菌或消毒方法依次是 2 培養(yǎng)大腸桿菌時 在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染 對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是 3 圖示是利用法進行微生物接種 把聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面 在灼燒接種環(huán)之后 要等其冷卻后再進行劃線的原因是 4 關于圖示的操作方法和結果 敘述正確的是 A 操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B 劃線操作須在火焰上進行C 在5區(qū)域中才可以找到所需菌落D 在1 2 3 4 5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌 5 若要培養(yǎng)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌 制備選擇培養(yǎng)基時在基本培養(yǎng)基的基礎上 注意和 其目的是 答案 1 高壓蒸汽滅菌干熱滅菌化學消毒 2 將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置一段時間 觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 3 平板劃線稀釋以免接種環(huán)溫度太高 殺死菌種 4 D 5 添加高濃度蔗糖 葡萄糖 調(diào)低pH提供高糖和酸性的篩選環(huán)境 解析 1 實驗過程中對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌 對培養(yǎng)皿進行干熱滅菌 實驗操作者的雙手進行化學消毒 2 在培養(yǎng)微生物時 接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染 對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置一段時間 觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 3 題圖所示的接種方法為平板劃線法 把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面 在灼燒接種環(huán)之后要等其冷卻后再進行劃線 以避免接種環(huán)溫度太高 殺死菌種 4 在利用平板劃線法接種微生物的實驗中 在圖示的1 2 3 4 5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌 5 在基本培養(yǎng)基上添加高濃度蔗糖 葡萄糖 和調(diào)低pH 可培養(yǎng)出具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌 變式2有些細菌可分解原油 從而消除由原油泄漏造成的土壤污染 某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株 回答問題 1 在篩選過程中 應將土壤樣品稀釋液接種于以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上 從功能上講 該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基 2 純化菌種時 為了得到單菌落 常采用的接種方法有兩種 即和 3 為了篩選出高效菌株 可比較單菌落周圍分解圈的大小 分解圈大說明該菌株的降解能力 4 通常情況下 在微生物培養(yǎng)過程中 實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌 和 無菌技術要求實驗操作應在酒精燈附近進行 以避免周圍環(huán)境中微生物的污染 答案 1 原油選擇 2 平板劃線法稀釋涂布平板法 3 強 4 干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰 解析 1 要獲得分解原油的細菌 只有在以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基中 這種細菌才可以大量繁殖 而其他細菌不能生存 此種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基 2 純化菌種常用平板劃線法和稀釋涂布平板法 3 在以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基上 在菌落周圍的原油被分解而形成分解圈 分解圈越大 說明該菌株降解能力越強 4 實驗室滅菌有灼燒滅菌 干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 實驗操作要在酒精燈火焰附近的無菌區(qū)進行 1 菊花的組織培養(yǎng)與月季的花藥培養(yǎng)的比較 2 植物激素 生長素和細胞分裂素 對實驗結果的影響 3 無土栽培技術 植物組織培養(yǎng)技術和微生物的培養(yǎng)技術的區(qū)別 上述無土栽培技術的操作并不需要保證無菌的條件 而其他兩種技術都要求嚴格的無菌條件 例3如圖是花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑 回答下列相關問題 1 通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株有兩種途徑 一種是花粉通過A階段發(fā)育成植株 另一種是花粉在誘導培養(yǎng)基上先形成B愈傷組織 再將其誘導分化成植株 這兩種途徑并沒有絕對的界限 主要取決于培養(yǎng)基中 2 選擇花藥時應選擇期的花藥 一般要通過來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期 確定花粉發(fā)育時期的方法有焙花青 鉻礬法和 3 材料消毒過程中用到的試劑有70 的酒精 無菌水 4 滅菌后的花蕾要在條件下接種到培養(yǎng)基上 培養(yǎng)過程中不需要光照 同時要控制好溫度 5 在花藥培養(yǎng)中 常常會出現(xiàn)的變化 因此需要對培養(yǎng)出來的植株做進一步的鑒定和篩選 6 誘導花粉植株能否成功及誘導成功率的高低 受多種因素影響 其中主要的影響因素是與 提高誘導成功率的另一個重要因素是 答案 1 胚狀體激素的種類及其濃度配比 2 初花鏡檢醋酸洋紅法 3 0 1 的氯化汞溶液 4 無菌 5 染色體倍性 6 材料的選擇培養(yǎng)基的組成選擇合適的花粉發(fā)育時期 解析 1 通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株有兩種途徑 一種是花粉通過胚狀體發(fā)育成植株 另一種是形成愈傷組織 二者沒有絕對的界限 取決于激素的種類及其濃度配比 2 選擇花藥的時期為初花期 通過鏡檢來確定花藥 確定花粉發(fā)育時期的方法有焙花青 鉻礬法和醋酸洋紅法 3 消毒用0 1 的氯化汞溶液和70 的酒精 4 接種及培養(yǎng)條件要求無菌 5 花藥培養(yǎng)可能會出現(xiàn)染色體倍性的變化 所以要鑒定 6 誘導花粉植株能否成功及誘導成功率的高低 受多種因素影響 主要有材料的選擇和培養(yǎng)基的組成 提高成功的另一個因素是選擇合適的花粉發(fā)育時期 花藥離體培養(yǎng)與花粉離體培養(yǎng)的差異 1 培養(yǎng)概念的差異 花藥離體培養(yǎng)是把花粉發(fā)育到一定階段的花藥接種到培養(yǎng)基上 從而改變花藥內(nèi)花粉粒的發(fā)育程序 使其分裂形成細胞團 進而分化成胚狀體 形成愈傷組織 由愈傷組織再分化成植株 花粉離體培養(yǎng)是指把花粉從花藥中分離出來 以單個花粉粒作為外植體進行離體培養(yǎng)的技術 由于花粉已是單倍體細胞 誘發(fā)它經(jīng)愈傷組織或胚狀體發(fā)育而成的植株都是單倍體 且不受花藥的藥隔 藥壁 花絲等體細胞的干擾 2 培養(yǎng)層次的差異 花藥離體培養(yǎng)屬器官培養(yǎng) 花粉離體培養(yǎng)屬細胞培養(yǎng)但花藥離體培養(yǎng)和花粉離體培養(yǎng)的目的一樣 都是要誘導花粉細胞發(fā)育成單倍體細胞 最后發(fā)育成單倍體植株 3 培養(yǎng)過程的差異 花藥離體培養(yǎng)相對較容易 技術比較成熟 但最后需要對培養(yǎng)成的植株進行染色體倍數(shù)檢測 花粉離體培養(yǎng)盡管不受花藥壁 藥隔等體細胞的干擾 但這種特殊單倍體細胞的培養(yǎng)技術難度較大 目前只在少數(shù)植物上獲得成功 變式3 2015 重慶三月質(zhì)檢 辣椒素廣泛用于食品保健 醫(yī)藥工業(yè)等領域 如圖表示辣椒試管苗及辣椒素的獲得途徑 請回答 1 圖中A表示 過程叫 2 對培養(yǎng)基徹底滅菌時 應采取的滅菌方法是 3 若通過途徑 提取辣椒素 培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素用量比值及使用順序是 4 若通過途徑 用萃取法提取辣椒素 主要步驟是 粉碎 干燥 萃取 和 5 萃取加熱過程中 要求溫度高 時間長 原因是 且需安裝冷凝回流裝置 其目的是 答案 1 外植體 或離體的植物組織或細胞 再分化 2 高壓蒸汽滅菌 3 比例適中 先使用生長素 后使用細胞分裂素 4 過濾濃縮 5 可使辣椒素充分溶解 萃取效果好防止有機溶劑的揮發(fā) 解析 本題考查植物組織培養(yǎng)技術 其原理是運用植物細胞的全能性 1 應用外植體或離體的植物組織或細胞進行培養(yǎng) 其過程為離體的組織或細胞脫分化成愈傷組織后再分化成胚狀體 2 操作時要對培養(yǎng)基進行高溫蒸汽滅菌 對所用的各種器具都要進行嚴格滅菌消毒 3 要獲得更多辣椒素 即要讓細胞大量增殖而不分化 故應先加生長素后加細胞分裂素 且兩種激素比例要適中 4 從植物體中提取各種植物有效成分要根據(jù)提取物質(zhì)的成分確定其提取方法 辣椒素提取的方法類似胡蘿卜素 主要步驟有粉碎 干燥 萃取 過濾 濃縮五個步驟 5 萃取時要長時間高溫加熱 能使提取物充分溶解 萃取效果好 同時為了避免萃取劑 主要是有機溶劑 揮發(fā) 應安裝冷凝回流裝置 1 方法與原理 2 直接使用酶 固定化酶和固定化細胞的比較 1 固定化細胞使用的都是活細胞 在反應時需要適宜的生存條件 2 由于固定化細胞保證了細胞的完整性 使用過程中酶的環(huán)境改變較小 所以對酶活性影響不大 3 影響酶活性的因素 酶的用量及應用實驗探究時注意的問題 1 實驗設計時要遵循單一變量和對照兩大原則 嚴格控制無關變量 2 探究不同溫度 或pH 對酶活性的影響時 以溫度 或pH 作為自變量 通常通過設置合理的梯度來確定最適值 最適值是通過比較相同時間內(nèi)獲得的產(chǎn)物量或反應效果來確定的 3 探究最適溫度時 pH為無關變量 探究最適pH時 溫度最好為最適溫度 4 探究果膠酶的最適用量時 所測出的最適用量是指在本實驗的溫度 pH等條件下測出的果膠酶用量 因而果膠酶的最適用量應標明溫度和pH 5 探討加酶洗衣粉的最適溫度要根據(jù)生活中實際情況 合理設置溫度梯度 6 在使用加酶洗衣粉時不但要考慮最佳洗滌效果條件 還要考慮到酶的專一性和洗滌成本的問題 例4 2015 廣東湛江高三調(diào)考 低溫蛋白酶是海洋嗜冷細菌分泌的酶類 最適溫度在20 左右 作為洗衣粉添加劑可在較低的溫度下達到理想的洗滌效果 圖為分離可分泌低溫蛋白酶的某種嗜冷菌的操作步驟 據(jù)圖回答問題 1 分裝前 對培養(yǎng)基要進行操作 為避免雜菌污染 要及時進行操作 2 將擴大培養(yǎng)后的深海微生物用法接種到含酪蛋白的固體培養(yǎng)基表面 在適宜條件下培養(yǎng)一段時間 挑出形成透明圈的單一菌落 即為初選出的嗜冷菌 從嗜冷菌分泌的蛋白質(zhì)中分離出低溫蛋白酶的最常用的方法是 3 為進一步檢測分離出的嗜冷蛋白酶的最適溫度 將該菌按如圖所示分5組分別置于中進行培養(yǎng) 組所對應的溫度為最適溫度 4 為提高酶的利用率 可以采用技術 常用的方法有 答案 1 調(diào)pH高壓蒸汽滅菌 2 稀釋涂布平板 或平板劃線 電泳法 3 恒溫箱透明圈與菌落直徑比值最大 4 固定化包埋法 或物理吸附法等 解析 1 分裝前 對培養(yǎng)基要進行調(diào)pH操作 為避免雜菌污染 要及時進行高壓蒸汽滅菌操作 2 可用稀釋涂布平板或平板劃線法將待選微生物接種到固體培養(yǎng)基表面 分離出酶的最常用的方法是電泳法 3 為進一步檢測分離出的嗜冷蛋白酶的最適溫度 應將該菌分5組 分別置于恒溫箱中進行培養(yǎng) 透明圈與菌落直徑比值最大組所對應的溫度為最適溫度 4 固定化技術可提高酶的利用率 常用的固定化方法有包埋法或物理吸附法 固定化酶和固定化細胞的原理是利用物理 化學方法 將酶或微生物細胞與固體的水不溶性支持物 或稱載體 相結合 使其既不溶于水 又能保持酶和微生物的活性 它們在固定狀態(tài)下既可作用于底物 又具有與離子交換樹脂相似的特點 而且還具有一定的機械強度 便于操作 由于酶和微生物細胞被固定在載體上 因而它們在反應結束后 還能夠再次使用 并在儲存較長時間后依然保持酶和微生物的活性不變 微生物細胞固定化常用的方法有三大類 物理吸附法 包埋法 化學結合法 變式4固定化酶是從20世紀60年代迅速發(fā)展起來的一種技術 東北農(nóng)業(yè)大學科研人員利用雙重固定法 即采用戊二醛作交聯(lián)劑 使酶相互連接 海藻酸鈉作為包埋劑來固定小麥酯酶 研究固定化酶的性質(zhì) 并對其最佳固定條件進行了探究 下圖顯示的是部分研究結果 注 酶活力為固定化酶催化化學反應的總效率 包括酶活性和酶的數(shù)量 分析回答下列問題 1 從對溫度變化適應性和應用范圍的角度分析 甲圖所示結果可得出的結論是固定化酶與游離酶的不同在于 2 乙圖曲線表明濃度為的海藻酸鈉包埋效果最好 當海藻酸鈉濃度較低時 酶活力較低原因是 3 固定化酶的活力隨使用次數(shù)的增多而下降 由丙圖可知 固定化酶一般可重復使用次 此后酶活力明顯下降 4 固定小麥酯酶不能采用海藻酸鈉直接包埋 必須先用戊二醛作交聯(lián)劑 這是因為 答案 1 固定化酶比游離酶對溫度變化適應性更強且應用范圍較廣 2 3 海藻酸鈉濃度較低時包埋不緊密 酶分子容易漏出 數(shù)量不足 3 3000 4 酶分子很小 很容易從包埋材料中漏出 解析 此題主要考查識圖的能力 要根據(jù)縱坐標和橫坐標的標注結合曲線的走勢和拐點進行分析 由甲圖可知 固定化酶在較高溫度下仍然具有較高的活性 乙和丙均較為簡單 但對考生讀圖識圖的能力有一定的要求 1 方法與原理 2 DNA和血紅蛋白的提取和分離的實驗流程比較 例5 2015 南京三月模擬 橘皮中提取的橘皮油是食品 化妝品和香水配料的優(yōu)質(zhì)原料 具有很高的經(jīng)濟價值 請回答下列有關橘皮精油提取的問題 1 為了提高出油率 需要將柑橘皮干燥去水 并用石灰水浸泡 用石灰水浸泡的目的是 2 壓榨液中含有橘皮精油和大量的水分 還有一些糊狀殘渣等雜質(zhì) 可以先用過濾除去固體物和殘渣 然后進一步除去質(zhì)量較小的殘留固體物 再用將上層的橘皮精油分離出來 此時的橘皮精油還含有少量的水和果蠟 需要在較低溫度下靜置5 7天 使雜質(zhì)沉淀 用吸管吸出上層澄清橘皮精油 其余部分通過過濾 濾液與吸出的上層橘油合并 成為最終的橘皮精油 3 請描述提取出的橘皮精油的特點 答案 1 防止橘皮壓榨時滑脫 提高出油率 2 普通布袋離心分液漏斗 或吸管 濾紙 3 無色透明有誘人的橘香味 解析 1 石灰水浸泡的目的是防止橘皮壓榨時滑脫 提高出油率 2 壓榨液中含有橘皮精油和大量的水分 還有一些糊狀殘渣等雜質(zhì) 可以先用普通布袋過濾除去固體物和殘渣 然后離心進一步除去質(zhì)量較小的殘留固體物 再用分液漏斗或吸管將上層的橘皮精油分離出來 此時的橘皮精油還含有少量的水和果蠟 需要在較低溫度下靜置5 7天 使雜質(zhì)沉淀 用吸管吸出上層澄清橘皮精油 其余部分通過濾紙過濾 濾液與吸出的上層橘油合并 成為最終的橘皮精油 3 橘皮精油的特點是無色透明 有誘人的橘香味 提取橘皮精油實驗需要注意的事項 1 實驗中要注意避免石灰水與皮膚接觸 2 為了能將橘皮均勻地浸泡在水中 橘皮放入家用榨汁機粉碎 但要注意安全 3 可以將未經(jīng)浸泡的樣品作為對照 探究浸泡時間對出油率的影響 4 兩次過濾 第一次用布袋 第二次用濾紙 5 要處理好溫度 5 10 和時間 5 7d 變式5在進行DNA親子鑒定時需大量的DNA PCR技術 多聚酶鏈式反應 可以使樣品DNA擴增 獲得大量DNA克隆分子 該技術的原理是利用DNA的半保留復制 在試管中進行DNA的人工復制 如圖 圖中黑色長方形是引物 可在很短的時間內(nèi)將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍 使實驗室所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體 1 圖中的變性 延伸分別是指 2 假設PCR反應中的DNA模板為P 第一輪循環(huán)產(chǎn)物2個子代DNA為N1 第二輪產(chǎn)物4個子代DNA為N2 N1 N2中分別含有模板DNA單鏈的DNA分別有個 個 若繼續(xù)循環(huán) 該DNA片段經(jīng)過50次循環(huán)后能形成個DNA片段 3 某樣品DNA分子中共含3000個堿基對 堿基數(shù)量滿足 A T G C 2 若經(jīng)5次循環(huán) 至少需要向試管中加入個腺嘌呤脫氧核苷酸 不考慮引物所對應的片段 4 若圖為第一輪循環(huán)產(chǎn)生的產(chǎn)物 請繪出以a鏈和b鏈為模板經(jīng)PCR擴增產(chǎn)物 答案 1 模板DNA雙鏈解旋形成單鏈在DNA聚合 Taq 酶的作用下 原料脫氧核苷酸聚合形成新的DNA鏈 2 22250 3 62000 4 如圖 a b鏈標注正確 每個引物的位置正確 解析 1 PCR技術中的變性是指模板DNA雙鏈解旋形成單鏈 延伸是指在DNA聚合 Taq 酶的作用下 原料脫氧核苷酸聚合形成新的DNA鏈 2 DNA具有半保留復制的特點 在PCR擴增過程中 自始至終每代都有原來的2個模板單鏈存在 經(jīng)過50次循環(huán)后能形成250個DNA片段 3 一個DNA分子中含有3000 2 1 3 2000個A 經(jīng)5次循環(huán) 至少需要向試管中加入腺嘌呤脫氧核苷酸 2000 25 1 62000個 4 a b鏈為模板擴增出的DNA分子與題干圖形相同 判斷正誤 1 酒精發(fā)酵過程中先產(chǎn)生水后產(chǎn)生酒 2 啤酒瓶子放置久了會在啤酒表面形成一層酵母菌繁殖形成的 白膜 3 腐乳制作有多種微生物參與 其中起主要作用的是根霉 4 含抗生素的牛奶能生產(chǎn)酸奶 5 新鮮蔬菜放置時間過長時亞硝酸鹽分解 含量較低 6 在任何條件下重鉻酸鉀與酒精反應呈灰綠色 7 培養(yǎng)乳酸桿菌時需要添加纖維素 8 培養(yǎng)霉菌 細菌時需要將培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)為堿性 9 棉織物不能使用添加纖維素酶的洗衣粉進行洗滌 10 CaCl2溶液的作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠 11 利用固定化酶降解水體中的有機磷農(nóng)藥 需提供適宜的營養(yǎng)條件 12 利用固定化酵母細胞進行發(fā)酵 糖類的作用只是作為反應底物 13 可用蒸餾水漲破細胞的方法從豬的紅細胞中提取到DNA和蛋白質(zhì) 14 蛋白質(zhì)提取和分離過程中進行透析可去除溶液中的DNA 15 利用透析法純化蛋白酶時 應以蒸餾水作為透析液 答案 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15