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高中生物顯微鏡觀察類實驗復習 徐以潤 江蘇省灌南縣高級中學（222500） 一、明確課標要求 a.能理解相關(guān)實驗的目的、原理、方法和操作步驟。 b.初步具備驗證生物學事實的能力，并能對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進行解釋、分析和處理。 c.具備初步探究一些生物學問題、恰當評價和完善實驗方案的能力。 內(nèi)容 課標要求 所在章節(jié) 1．檢測生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì) a 必修1第2章第1節(jié)：細胞中的元素和化合物 2．用顯微鏡觀察多種多樣的細胞 a 必修1第1章第2節(jié)：細胞的多樣性和統(tǒng)一性 3．觀察葉綠體和線粒體 a 必修1第3章第2節(jié)：細胞器——系統(tǒng)內(nèi)的分工合作 4．觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復原 b 必修1第4章第1節(jié)：物質(zhì)跨膜運輸?shù)膶嵗? 5．觀察細胞的有絲分裂 b 必修1第6章第1節(jié)：細胞的增殖 6．觀察細胞的減數(shù)分裂 a 必修2第2章第1節(jié)：減數(shù)分裂和受精作用 二、各實驗比較： 在此類實驗中常綜合運用顯微觀察技術(shù)、染色技術(shù)、玻片標本制作技術(shù)等。歸類如表： 實驗名稱 觀察方式 觀察對象 顯微鏡 玻片標本 染色劑 生物材料 用顯微鏡觀察多種多樣的細胞 原色觀察 多種生物細胞 高倍 臨時裝片 無 真菌、植物細胞、動物細胞 觀察葉綠體 葉綠體 高倍 臨時裝片 蘚類葉 觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復原 紫色大液泡 高倍 臨時裝片 紫色洋蔥表皮 觀察線粒體 染色觀察 線粒體 高倍 臨時裝片 健那綠 人的口腔上皮細胞 觀察細胞的有絲分裂 染色體 高倍 臨時裝片 龍膽紫或醋酸洋紅 洋蔥根尖 脂肪的檢測 脂肪 高倍 臨時裝片 蘇丹III或蘇丹IV 花生種子 觀察細胞的減數(shù)分裂 染色體 高倍 固定裝片 堿性染料 蝗蟲精母細胞 三、觀察類實驗應(yīng)注意的問題 注意取材。 注意材料處理：浸泡、染色、解離、保持生活狀態(tài)等。 注意制片方法：裝片法、切片法、壓片法。 注意光學顯微鏡的使用方法。 四、經(jīng)典例題 例1：(顯微鏡類.)顯微鏡鏡頭盒中有4個鏡頭。甲、乙鏡頭一端有螺紋，丙、丁皆無螺紋，甲長3cm，乙長5cm，丙長3cm，丁長6cm。問：調(diào)好焦距以后，物鏡與裝片之間距離最近的是 ，在同樣光源條件下，視野中光線最暗的一組鏡頭是 。 解析：根據(jù)顯微鏡的結(jié)構(gòu)可知，甲、乙鏡頭一端有螺紋為物鏡，丙、丁無螺紋為目鏡。物鏡越長，放大倍數(shù)越大，工作距離越短，即與裝片之間的距離越近。目鏡越短，放大倍數(shù)越大。在同樣光源條件下，顯微鏡的放大倍數(shù)越大，視野中光線越暗。答案：乙 乙與丙。 例2：用高倍顯微鏡觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂。下列描述正確的是： A．處于分裂間期和中期的細胞數(shù)目大致相等 B．視野中不同細胞的染色體數(shù)目可能不相等 C．觀察處于分裂中期的細胞，可清晰看到赤道板和染色體 D．細胞是獨立分裂的，因此可選一個細胞持續(xù)觀察它的整個分裂過程 解析：洋蔥根尖細胞的有絲分裂間期時間長，分裂期時間短。所以高倍顯微鏡觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂時，處于分裂間期的細胞數(shù)目遠多于分裂期細胞數(shù)目。赤道板是認為規(guī)定的細胞中央的一個平面，沒有物質(zhì)結(jié)構(gòu)，所以看不到。洋蔥根尖細胞在解離時就死亡了，各個細胞只停止在有絲分裂的某一時期。因此看不到一個細胞持續(xù)分裂過程。答案：B 例3：用洋蔥鱗片葉表皮制備“觀察細胞質(zhì)壁分離實驗”的臨時裝片，觀察細胞的變化。下列有關(guān)實驗操作和結(jié)果的敘述，正確的是 A．將裝片在酒精燈上加熱后，再觀察細胞質(zhì)壁分離現(xiàn)象 B．在蓋玻片一側(cè)滴入清水，細胞吸水膨脹但不會破裂 C．用不同濃度的硝酸鉀溶液處理細胞后，均能觀察到質(zhì)壁分離復原現(xiàn)象 D．當質(zhì)壁分離不能復原時，細胞仍具正常生理功能 解析：加熱細胞死亡，不能發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象。用不同濃度的硝酸鉀溶液處理細胞后，不可能都觀察到質(zhì)壁分離復原現(xiàn)象。當質(zhì)壁分離不能復原時，細胞可能死亡，細胞就不具正常生理功能。答案：B 例4：請根據(jù)下面提供的實驗材料和用品，設(shè)計一個探究洋蔥表皮細胞下細胞液濃度的實驗。寫出詳細步驟，并說明判斷細胞液濃度的依據(jù)。 實驗材料和用品：顯微鏡、蓋玻片、載玻片、刀片、鑷子、濾紙、小培養(yǎng)皿、移液管、滴管、燒杯、容量瓶、1 mol/L蔗糖、蒸餾水等 （1）實驗課題：__________________ ____________ （2）實驗原理：_________________ _________________ （3）判斷此洋蔥細胞液濃度的依據(jù)： （4）主要實驗方案： （5）請設(shè)計實驗結(jié)果記錄表（注意表格中的有關(guān)的合理信息）： （6）試以坐標曲線表示實驗結(jié)果，并在曲線上標出檢測細胞液濃度。 解析： （1）實驗課題：洋蔥表皮細胞的細胞液濃度的測定 （2）實驗原理：滲透作用原理 （3）判斷此洋蔥細胞液濃度的依據(jù)： 當外界蔗糖溶液濃度>細胞液濃度時，細胞質(zhì)壁分離，而等于時則不發(fā)生質(zhì)壁分離。又因為一個組織中各細胞的細胞液濃度不完全一樣，所以實際操作中，鏡下觀察到50%的細胞處于初始質(zhì)壁分離時，該蔗糖濃度等于細胞液平均濃度。 (4)主要實驗方案： ①用1 mol/L蔗糖溶液配制出0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7 mol/L的蔗糖溶液各10ml，分別加到小培養(yǎng)皿中并標明，加蓋以免水分蒸發(fā)而改變蔗糖溶液濃度。 ②從相同部位的植物組織上剝?nèi)”砥?，切成約3~4個平方毫米的小塊。迅速依次浸入不同濃度的蔗糖溶液中，每一小培養(yǎng)皿中放3塊。每一濃度相隔10min，以便有充分的時間觀察。 ③約過30min后，依次取出材料，放在載玻片上，并用滴管加1~2滴相應(yīng)的蔗糖溶液，蓋上蓋玻片，在鏡下觀察，每個樣品檢查100個細胞左右，并將結(jié)果記錄、分析。 （5）：實驗數(shù)據(jù)記錄表 培養(yǎng)皿號 蔗糖溶液（mol/L） 發(fā)生初始質(zhì)壁分離細胞占觀察細胞數(shù)量的百分比 1 0.2 2 0.3 3 0.4 4 0.5 5 0.6 6 0.7 （6）試以坐標曲線表示實驗結(jié)果，并在曲線上標出檢測細胞液濃度。