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人教選修3《動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)》ppt課件

上傳人:20****08 文檔編號(hào):241307426 上傳時(shí)間:2024-06-17 格式:PPT 頁數(shù):22 大?。?03.04KB
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1、2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程2.2.1 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)n動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(animalcellculture)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中讓這些細(xì)胞生長和增值。那么,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程是怎樣的呢?培養(yǎng)時(shí)又需要哪些條件呢?一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(animal cell cul一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)n動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程取組織塊剪碎組織用酶,處理組織細(xì)胞懸浮液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶,使之分散成單個(gè)細(xì)胞用培養(yǎng)液稀釋制成細(xì)胞懸浮液一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程取組織塊剪碎

2、組織用酶,處理一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)n動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程取樣組織剪碎組織酶處理組織制成懸浮液原代培養(yǎng)n定義:動(dòng)物組織經(jīng)酶解消化后的初次培養(yǎng)。n細(xì)胞貼壁:懸液中分散的細(xì)胞貼附在瓶壁上。n接觸抑制:當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)n動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程取樣組織剪碎組織酶處理組織制成懸浮液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)n貼壁細(xì)胞重新用胰蛋白酶處理,然后分瓶培養(yǎng),讓細(xì)胞繼續(xù)增殖。1.一般傳至10代后就不易傳下去了。2.一般來說,10-50代時(shí)增殖逐漸減慢,以至于完全停止,這部分細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化。3.目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為

3、10代以內(nèi),以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。4.如若繼續(xù)傳代培養(yǎng),少數(shù)細(xì)胞由于發(fā)生突變獲得不死性,朝著癌細(xì)胞的方向發(fā)展。一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程一般傳至10代后就不易傳下一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)n動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件無菌無毒的環(huán)境營養(yǎng)溫度和pH氣體環(huán)境一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)n動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件無菌無毒的環(huán)境n首先,保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對(duì)培養(yǎng)液、培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。n通常在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,防止污染。n此外,定期更換培養(yǎng)液,清除代謝產(chǎn)物,防止有害代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)n動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

4、的條件無菌無毒的環(huán)境營養(yǎng)n細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同n合成培養(yǎng)基(糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等)按所需種類和數(shù)量嚴(yán)格配置,并加血清、血漿等天然成分。一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)n動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件無菌無毒的環(huán)境營養(yǎng)溫度和pHn一般與動(dòng)物體溫相近36.5 0.5為宜n多數(shù)細(xì)胞生存的pH為7.2-7.4一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)n動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件無菌無毒的環(huán)境營養(yǎng)溫度和pH氣體環(huán)境nO2和CO2,維持細(xì)胞代謝和pHn混合氣體培養(yǎng)箱95%空氣加5%CO2一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)n動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用

5、提取免疫活性物質(zhì),病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等基因工程的受體細(xì)胞檢測(cè)有毒物質(zhì),判斷某物質(zhì)的毒性培養(yǎng)正常細(xì)胞或病變細(xì)胞,用于生理、病理、藥理研究一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞植物細(xì)胞全能性組織培養(yǎng)植物體?二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞植物細(xì)胞全二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物n體細(xì)胞核移植(nuclear transfer)是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。哺乳動(dòng)物核移植胚胎細(xì)胞核移植(容易)體細(xì)胞核移植(較難)二、動(dòng)物體細(xì)

6、胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植(nuclea二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物n體細(xì)胞核移植的過程詳見教材48頁圖2-21 體細(xì)胞核移植過程流程圖1、為何要對(duì)M中期的次級(jí)卵母細(xì)胞去核?2、為何將供體細(xì)胞而不是供體細(xì)胞的核注入去核卵母細(xì)胞?3、誘導(dǎo)兩細(xì)胞融合的方法是什么?4、激活受體細(xì)胞的方法是什么?二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過程1、為何二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物n體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景畜牧業(yè)醫(yī)藥衛(wèi)生其他領(lǐng)域二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物n體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景畜牧業(yè)n加速家畜遺傳改良,促進(jìn)

7、優(yōu)良畜群繁育n保護(hù)瀕危物種,增加瀕危物種存活數(shù)量二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物n體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景畜牧業(yè)醫(yī)藥衛(wèi)生n轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物可作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)要用蛋白;n轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物細(xì)胞、組織、器官可作為異種移植的供體;n人的核移植胚胎干細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化,形成相應(yīng)的組織、器官,用于組織器官移植二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物n體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景畜牧業(yè)醫(yī)藥衛(wèi)生其他領(lǐng)域n克隆動(dòng)物和克隆細(xì)胞,可使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過程;n用克隆動(dòng)物做疾病模型,能使人們更好

8、的追蹤研究疾病的發(fā)展過程和治療疾病。二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物n體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題成功率低n產(chǎn)下的克隆動(dòng)物占移植克隆胚胎的比率平均不到10%。二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物n體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題成功率低技術(shù)環(huán)節(jié)有待改進(jìn)健康問題二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物n體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題成功率低技術(shù)環(huán)節(jié)有待改進(jìn)健康問題遺傳和生理缺陷n體型過大、異常肥胖、發(fā)育困難、臟器缺陷、免疫失調(diào)等二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物n體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題成功率低技術(shù)環(huán)節(jié)有待改進(jìn)健康問題遺傳和生理缺陷安全性問題存在爭議二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題

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