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1、顯微鏡的構(gòu)造和使用一、目的要求1、了解顯微鏡的構(gòu)造及其維護(hù)2、初步掌握顯微鏡的使用方法,顯微鏡的使用,光學(xué)顯微鏡（以下簡(jiǎn)稱為顯微鏡），是用來(lái)觀察肉眼看不見的微小生物結(jié)構(gòu)的。雖然電子顯徽鏡已經(jīng)問世，但是，在目前一般的科學(xué)研究和教學(xué)中，顯徽鏡仍然是重要的、較為精密的生物觀察儀器。為了正確操作、妥善保管和維護(hù)顯微鏡，使之延長(zhǎng)使用年限，必須了解顯微鏡的結(jié)構(gòu)和功能。,（一）顯微鏡的構(gòu)造一般光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造包括兩大部分，即保證成象的光學(xué)系統(tǒng)和用以裝置光學(xué)系統(tǒng)的機(jī)械部分。,1、機(jī)械部分（1）鏡座：是顯微鏡的底座，支持整個(gè)鏡體，使顯微鏡放置穩(wěn)固。（2）鏡柱：鏡座上面直立的短柱，支持鏡體上部的各部分。（3）鏡臂

2、：彎曲如臂，下連鏡柱，上連鏡筒，這取放鏡體時(shí)手握的部位。鏡臂的下端與鏡柱連接處有一活動(dòng)關(guān)節(jié)，可使鏡體在一定范圍內(nèi)后傾，便于觀察。,（4）鏡筒：為顯微鏡上部圓形中空的長(zhǎng)筒，其上端放置目鏡，下端與物鏡轉(zhuǎn)換器相連。（5）物鏡轉(zhuǎn)換器：接于鏡筒下端的圓盤，可自由轉(zhuǎn)動(dòng)，盤上有3-4個(gè)螺旋圓孔，為安裝物鏡的部位，當(dāng)旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器時(shí)，物鏡即可固定在使用的位置上，保證物鏡與目鏡的光線合軸。（6）載物臺(tái)：為放置玻片標(biāo)本的平臺(tái)，中央有一圓孔，以通過光線。兩旁裝有壓片夾，可固定玻片標(biāo)本。,（7）調(diào)焦裝置：為了得到清晰的物像，必須調(diào)節(jié)物鏡與標(biāo)本之間的距離，使它與物鏡的工作距離相等。這種操作叫調(diào)焦。在鏡臂兩側(cè)有粗、細(xì)調(diào)焦螺旋

3、各一對(duì)，旋轉(zhuǎn)時(shí)可使鏡筒上升或下降。大的一對(duì)是粗準(zhǔn)焦螺旋，調(diào)動(dòng)鏡筒升降距離大，旋轉(zhuǎn)一周可使鏡筒移動(dòng)2毫米左右。小的一對(duì)是細(xì)焦螺旋，調(diào)動(dòng)鏡筒的升降距離很小，旋轉(zhuǎn)一周可使鏡筒移動(dòng)約0.1毫米。在用低倍物鏡觀察時(shí)，使用粗調(diào)焦螺旋；用高倍物鏡觀察時(shí)，用細(xì)調(diào)焦螺旋。（8）聚光器：以調(diào)節(jié)光線。,2、光學(xué)部分由成像系統(tǒng)和照明系統(tǒng)組成，成像系統(tǒng)包括物鏡和目鏡，照明系統(tǒng)包括反光鏡和聚光器。。,目鏡： 直插式：長(zhǎng)度和放大倍數(shù)成反比。 規(guī)格：5倍、10倍、16倍和40倍,物鏡： 螺旋式：長(zhǎng)度和放大倍數(shù)成正比。 規(guī)格：10倍和40倍,特別說明： 放大倍數(shù)和與蓋玻片之間的距離成反比。,放大倍數(shù)=目鏡放大倍數(shù)物鏡放大倍數(shù)

4、低倍鏡：放大倍數(shù)小，凹度小，直徑大，通光量多，視野亮； 高倍鏡：和低倍鏡正好相反,該放大倍數(shù)指的是長(zhǎng)度或?qū)挾龋?而不是面積和體積。,如圖6-4中、表示物鏡長(zhǎng)度，、表示目鏡長(zhǎng)度，、表示物鏡與玻片的距離，獲得最大物像時(shí)正確的組合為,A、 B、 C、 D、,視野及鏡像亮度：視野是指一次所能觀察的被測(cè)標(biāo)本的范圍。 視野的大小與放大倍數(shù)成反比，既放大倍數(shù)越大視野越小，看到的標(biāo)本范圍就越小。 鏡像亮度是指視野里所看到的像的亮暗程度。它與放大倍數(shù)成反比，即在光源一定的情況下，放大倍數(shù)越大，視野越暗。,（3）反光鏡（反射鏡）：是個(gè)圓形的兩面鏡。一面是平面鏡，能反光；另一面是凹面鏡，兼有反光和匯集光線的作用，

5、可選擇使用，反光鏡具有能轉(zhuǎn)動(dòng)的關(guān)節(jié)，可作各種方向的翻轉(zhuǎn)，面向光源，能將光線反射在聚光器上。,顯微鏡的使用,,1右手握住鏡臂，左手托住鏡座,2把顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，略偏左（顯微鏡放在距實(shí)驗(yàn)臺(tái)邊緣7厘米左右）。安裝好目鏡和物鏡。,顯微鏡的使用,3轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔(物鏡的前端與載物臺(tái)要保持5厘米的距離)。,顯微鏡的使用,顯微鏡的使用,三、觀察,5把所要觀察的玻片標(biāo)本放在 載物臺(tái)上，用壓片夾壓住，標(biāo)本要正對(duì)通光孔的中心。,6轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止（眼 睛看著物鏡，以免物鏡碰到玻片標(biāo)本）。,7向目鏡內(nèi)看，同時(shí)反方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直 到看

6、清物像為止。再略微轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，使看到的物像更加清晰。,顯微鏡的使用,8、換高倍物鏡：如果進(jìn)一步使用高倍物鏡觀察，應(yīng)在轉(zhuǎn)換高倍物鏡之前，把物像中需要放大觀察的部分移至視野中央（將低倍物鏡轉(zhuǎn)換成高倍物鏡觀察時(shí)，視野中的物像范圍縮小了很多）。如果換高倍物鏡后物像不一定很清晰，可以轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋進(jìn)行調(diào)節(jié)。 在轉(zhuǎn)換高倍物鏡并且看清物像之后，可以根據(jù)需要調(diào)節(jié)光圈或聚光器，使光線符合要求（一般將低倍物鏡換成高倍物鏡觀察時(shí)，視野要稍變暗一些，所以需要調(diào)節(jié)光線強(qiáng)弱）。,3.使用顯微鏡的注意事項(xiàng),（1）顯微鏡安放位置， 顯微鏡應(yīng)安放在離桌邊緣5 cm、鏡筒向前，并講清顯微鏡位置稍靠左側(cè)的道理（兩眼同時(shí)睜開

7、觀察，眼不易疲勞，便于繪圖。） （2） 對(duì)光根據(jù)光線的強(qiáng)弱來(lái)選擇平面鏡或凹面鏡；用低倍鏡進(jìn)行對(duì)光，把低倍鏡位置放低；在轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器時(shí)，物鏡到位，光圈調(diào)節(jié)好，視野光線均勻、明亮.,（3）正確使用高倍物鏡的方法 由于高倍物鏡的工作距離小，鏡頭易損壞，,并且把光圈開大。（4）重視準(zhǔn)焦螺旋的使用 在使用高倍物鏡時(shí)，不要調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋，避免物鏡損壞、裝片壓爛。（5）不是倍數(shù)越大，越清晰 如果目鏡倍數(shù)過大，得到的放大虛像則很不清晰。在低倍鏡下能看清楚的物像，不必用高倍鏡觀察。,3.使用顯微鏡的注意事項(xiàng),視野中物像與標(biāo)本移動(dòng)的關(guān)系： 如視野中某觀察對(duì)象位于左下方如何移到中央，應(yīng)將裝片或切片向左下方移動(dòng)（同

8、向移動(dòng)）。原因是視野中物像移動(dòng)的方向或切片移動(dòng)的方向相反,污點(diǎn)判斷： 玻片移，污點(diǎn)移，則污點(diǎn)在玻片上； 物鏡換，污點(diǎn)移，則污點(diǎn)在物鏡上； 目鏡轉(zhuǎn)，污點(diǎn)移，則污點(diǎn)在目鏡上,目鏡5X、物鏡4X、視野中央有一排細(xì)胞共15個(gè)。若把物鏡換成10X，則細(xì)胞數(shù)目為（ ）個(gè)。因?yàn)橐曇爸械募?xì)胞數(shù)目與放大倍數(shù)成反比；若目鏡5X，物鏡4X，視野中共有50個(gè)細(xì)胞，再把物鏡換成10X，則視野中有（ ）個(gè)細(xì)胞。因?yàn)橐曇爸锌吹降膶?shí)物的范圍與放大倍數(shù)的平方成反比。,練習(xí)：,洋蔥鱗葉表皮細(xì)胞(1010),洋蔥鱗葉表皮細(xì)胞(1040),洋蔥鱗葉表皮細(xì)胞(1040),洋蔥鱗葉表皮細(xì)胞裝片（10 40）,,,,細(xì)胞壁,細(xì)胞核,細(xì)胞質(zhì)(液泡),