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1、顯微鏡的構造和使用一、目的要求1、了解顯微鏡的構造及其維護2、初步掌握顯微鏡的使用方法,顯微鏡的使用,光學顯微鏡（以下簡稱為顯微鏡），是用來觀察肉眼看不見的微小生物結構的。雖然電子顯徽鏡已經(jīng)問世，但是，在目前一般的科學研究和教學中，顯徽鏡仍然是重要的、較為精密的生物觀察儀器。為了正確操作、妥善保管和維護顯微鏡，使之延長使用年限，必須了解顯微鏡的結構和功能。,（一）顯微鏡的構造一般光學顯微鏡的構造包括兩大部分，即保證成象的光學系統(tǒng)和用以裝置光學系統(tǒng)的機械部分。,1、機械部分（1）鏡座：是顯微鏡的底座，支持整個鏡體，使顯微鏡放置穩(wěn)固。（2）鏡柱：鏡座上面直立的短柱，支持鏡體上部的各部分。（3）鏡臂

2、：彎曲如臂，下連鏡柱，上連鏡筒，這取放鏡體時手握的部位。鏡臂的下端與鏡柱連接處有一活動關節(jié)，可使鏡體在一定范圍內(nèi)后傾，便于觀察。,（4）鏡筒：為顯微鏡上部圓形中空的長筒，其上端放置目鏡，下端與物鏡轉換器相連。（5）物鏡轉換器：接于鏡筒下端的圓盤，可自由轉動，盤上有3-4個螺旋圓孔，為安裝物鏡的部位，當旋動轉換器時，物鏡即可固定在使用的位置上，保證物鏡與目鏡的光線合軸。（6）載物臺：為放置玻片標本的平臺，中央有一圓孔，以通過光線。兩旁裝有壓片夾，可固定玻片標本。,（7）調焦裝置：為了得到清晰的物像，必須調節(jié)物鏡與標本之間的距離，使它與物鏡的工作距離相等。這種操作叫調焦。在鏡臂兩側有粗、細調焦螺旋

3、各一對，旋轉時可使鏡筒上升或下降。大的一對是粗準焦螺旋，調動鏡筒升降距離大，旋轉一周可使鏡筒移動2毫米左右。小的一對是細焦螺旋，調動鏡筒的升降距離很小，旋轉一周可使鏡筒移動約0.1毫米。在用低倍物鏡觀察時，使用粗調焦螺旋；用高倍物鏡觀察時，用細調焦螺旋。（8）聚光器：以調節(jié)光線。,2、光學部分由成像系統(tǒng)和照明系統(tǒng)組成，成像系統(tǒng)包括物鏡和目鏡，照明系統(tǒng)包括反光鏡和聚光器。。,目鏡： 直插式：長度和放大倍數(shù)成反比。 規(guī)格：5倍、10倍、16倍和40倍,物鏡： 螺旋式：長度和放大倍數(shù)成正比。 規(guī)格：10倍和40倍,特別說明： 放大倍數(shù)和與蓋玻片之間的距離成反比。,放大倍數(shù)=目鏡放大倍數(shù)物鏡放大倍數(shù)

4、低倍鏡：放大倍數(shù)小，凹度小，直徑大，通光量多，視野亮； 高倍鏡：和低倍鏡正好相反,該放大倍數(shù)指的是長度或寬度， 而不是面積和體積。,如圖6-4中、表示物鏡長度，、表示目鏡長度，、表示物鏡與玻片的距離，獲得最大物像時正確的組合為,A、 B、 C、 D、,視野及鏡像亮度：視野是指一次所能觀察的被測標本的范圍。 視野的大小與放大倍數(shù)成反比，既放大倍數(shù)越大視野越小，看到的標本范圍就越小。 鏡像亮度是指視野里所看到的像的亮暗程度。它與放大倍數(shù)成反比，即在光源一定的情況下，放大倍數(shù)越大，視野越暗。,（3）反光鏡（反射鏡）：是個圓形的兩面鏡。一面是平面鏡，能反光；另一面是凹面鏡，兼有反光和匯集光線的作用，

5、可選擇使用，反光鏡具有能轉動的關節(jié)，可作各種方向的翻轉，面向光源，能將光線反射在聚光器上。,顯微鏡的使用,,1右手握住鏡臂，左手托住鏡座,2把顯微鏡放在實驗臺上，略偏左（顯微鏡放在距實驗臺邊緣7厘米左右）。安裝好目鏡和物鏡。,顯微鏡的使用,3轉動轉換器，使低倍物鏡對準通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持5厘米的距離)。,顯微鏡的使用,顯微鏡的使用,三、觀察,5把所要觀察的玻片標本放在 載物臺上，用壓片夾壓住，標本要正對通光孔的中心。,6轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標本為止（眼 睛看著物鏡，以免物鏡碰到玻片標本）。,7向目鏡內(nèi)看，同時反方向轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直 到看

6、清物像為止。再略微轉動細準焦螺旋，使看到的物像更加清晰。,顯微鏡的使用,8、換高倍物鏡：如果進一步使用高倍物鏡觀察，應在轉換高倍物鏡之前，把物像中需要放大觀察的部分移至視野中央（將低倍物鏡轉換成高倍物鏡觀察時，視野中的物像范圍縮小了很多）。如果換高倍物鏡后物像不一定很清晰，可以轉動細準焦螺旋進行調節(jié)。 在轉換高倍物鏡并且看清物像之后，可以根據(jù)需要調節(jié)光圈或聚光器，使光線符合要求（一般將低倍物鏡換成高倍物鏡觀察時，視野要稍變暗一些，所以需要調節(jié)光線強弱）。,3.使用顯微鏡的注意事項,（1）顯微鏡安放位置， 顯微鏡應安放在離桌邊緣5 cm、鏡筒向前，并講清顯微鏡位置稍靠左側的道理（兩眼同時睜開

7、觀察，眼不易疲勞，便于繪圖。） （2） 對光根據(jù)光線的強弱來選擇平面鏡或凹面鏡；用低倍鏡進行對光，把低倍鏡位置放低；在轉動轉換器時，物鏡到位，光圈調節(jié)好，視野光線均勻、明亮.,（3）正確使用高倍物鏡的方法 由于高倍物鏡的工作距離小，鏡頭易損壞，,并且把光圈開大。（4）重視準焦螺旋的使用 在使用高倍物鏡時，不要調節(jié)粗準焦螺旋，避免物鏡損壞、裝片壓爛。（5）不是倍數(shù)越大，越清晰 如果目鏡倍數(shù)過大，得到的放大虛像則很不清晰。在低倍鏡下能看清楚的物像，不必用高倍鏡觀察。,3.使用顯微鏡的注意事項,視野中物像與標本移動的關系： 如視野中某觀察對象位于左下方如何移到中央，應將裝片或切片向左下方移動（同

8、向移動）。原因是視野中物像移動的方向或切片移動的方向相反,污點判斷： 玻片移，污點移，則污點在玻片上； 物鏡換，污點移，則污點在物鏡上； 目鏡轉，污點移，則污點在目鏡上,目鏡5X、物鏡4X、視野中央有一排細胞共15個。若把物鏡換成10X，則細胞數(shù)目為（ ）個。因為視野中的細胞數(shù)目與放大倍數(shù)成反比；若目鏡5X，物鏡4X，視野中共有50個細胞，再把物鏡換成10X，則視野中有（ ）個細胞。因為視野中看到的實物的范圍與放大倍數(shù)的平方成反比。,練習：,洋蔥鱗葉表皮細胞(1010),洋蔥鱗葉表皮細胞(1040),洋蔥鱗葉表皮細胞(1040),洋蔥鱗葉表皮細胞裝片（10 40）,,,,細胞壁,細胞核,細胞質(液泡),