單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,*,資料僅供參考,不當之處，請聯(lián)系改正。,第一節(jié)概述,第二節(jié)血脂、脂蛋白及載脂蛋白測定,本章內(nèi)容概要,本章內(nèi)容概要,教學目標和要求,1、,掌握,脂蛋白的分類及其主要功能；高脂血癥的分型及血液生化特點；血脂、脂蛋白和載脂蛋白測定的原理和方法。,2、,熟悉,各種脂蛋白的組成與結構要點；異常脂蛋白血癥的原因；血脂檢查前應注意的問題。,3、,了解,載脂蛋白的種類與生理功能；各個檢驗項目的臨床意義和應用。,教學目標和要求1、掌握脂蛋白的分類及其主要功能；高脂血癥的分,動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS),冠心病急性事件,（不穩(wěn)定型心絞痛、急性心肌梗死和冠脈猝死）,血脂、血漿脂蛋白及載脂蛋白檢驗的重要性,動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS),第一節(jié) 概述,血脂及血漿脂蛋白,脂蛋白代謝紊亂,第一節(jié) 概述血脂及血漿脂蛋白,一、血脂及血漿脂蛋白,血脂：是血漿中的中性脂肪（,甘油三酯和膽固醇,）和類脂（磷脂、糖脂、固醇、類固醇）的總稱,定義：,脂蛋白：脂類難溶于水，正常血漿脂類物質(zhì),與蛋白質(zhì)結合成脂蛋白的形式存在。,一、血脂及血漿脂蛋白 血脂：是血漿中的中性脂肪（甘油三,（一）血漿脂蛋白的分類,超速離心法：,根據(jù)脂蛋白在一定密度的介質(zhì)中漂浮速率不同而進行分離的方法。,電泳法：,根據(jù)不同密度的脂蛋白所含蛋白質(zhì)的表面電荷不同，,利用電泳將其分離，并與血漿蛋白質(zhì)的遷移率比較以判斷其部位,。,分離方法,（一）血漿脂蛋白的分類超速離心法：根據(jù)脂蛋白在一定密度的介質(zhì),超速離心法：,乳糜微粒,（chylomicron,CM）,極低密度脂蛋白,（very low density lipoprotein,VLDL）,中間密度脂蛋白（intermediate density lipoprotein,IDL）,低密度脂蛋白,（low density lipoprotein，LDL）,高密度脂蛋白,（high density lipoprotein，HDL,脂蛋白（a）lipoprotein(a),Lp(a),乳糜微粒、前-,、,和,四條脂蛋白區(qū)帶,電泳法,超速離心法：乳糜微粒（chylomicron,CM）極低密度,血脂和血漿脂蛋白檢驗醫(yī)學知識課件,（二）血漿脂蛋白的組成與結構,組成：,蛋白質(zhì)、甘油三酯、磷脂（phospholipid，PL）、游離膽固醇（free cholesterol，F(xiàn)C）及膽固醇酯（cholesterol ester，CE）等成分組成。,（二）血漿脂蛋白的組成與結構組成：蛋白質(zhì)、甘油三酯,結構：,大致為球形顆粒，由兩大部分組成，即疏水性的內(nèi)核和親水性的外殼（圖10-1）。內(nèi)核由不同量的CE與TG組成，表層由載脂蛋白、PL及FC組成，F(xiàn)C及PL的極性基團向外露在血漿中，載脂蛋白是兼性化合物，它的疏水部分掩蔽在脂蛋白中，而親水部分突出于脂蛋白顆粒的表面。,結構：大致為球形顆粒，由兩大部分組成，即疏水性的內(nèi)核,（三）載脂蛋白,脂蛋白的蛋白部分稱為載脂蛋白(apolipoprotein，Apo),定義：,種類：,按1972年Alaupovic建議的命名方法，用英文字母順序編碼，分為ApoA、B、C、D、E、F、G、H、J等。由于氨基酸組成的差異，每一型又可分若干亞型。,（三）載脂蛋白脂蛋白的蛋白部分稱為載脂蛋白(apolipop,功能：,與脂質(zhì)的親和作用而使脂質(zhì)溶于水性介質(zhì)中。,運轉(zhuǎn)膽固醇和甘油三酯。,作為脂蛋白外殼的結構成分，與脂蛋白外生物信息相聯(lián)系。,以配體的形式作為脂蛋白與特異受體的連接物。,激活某些與血漿脂蛋白代謝有關的酶類,分布及特點：略,功能：與脂質(zhì)的親和作用而使脂質(zhì)溶于水性介質(zhì)中。分布及特點,（四）脂蛋白受體,定義：,脂蛋白受體是一類位于細胞膜上的糖蛋白。它能以高,度的親和方式與相應的脂蛋白配體作用，從而介導細胞對,脂蛋白的攝取與代謝，進一步調(diào)節(jié)細胞外脂蛋白的水平。,（四）脂蛋白受體定義：脂蛋白受體是一類位于細胞膜上的,脂蛋白與脂蛋白受體的作用：,不僅是運送脂蛋白至細胞所必需，也是從血和外周組織中有效清除具有潛在致動脈粥樣硬化的脂蛋白所必需的。,種類：,已有很多種，主要有,LDL受體、殘粒受體（remnant receptor）及清道夫受體,（scavenger receptor）。,脂蛋白與脂蛋白受體的作用：不僅是運送脂蛋白至細胞所,LDL受體：,不僅能識別ApoB100，也可識別ApoE，在細胞結合、攝取和降解LDL及其它含ApoB100的脂蛋白過程中起中介作用，對維持細胞和全身膽固醇平衡起重要作用。,各種脂蛋白受體功能,殘粒受體：,能識別ApoE，是清除血液循環(huán)中CM殘粒和-VLDL殘粒的主要受體，它也能結合含ApoE的HDL。,清道夫受體：,主要存在于巨噬細胞表面,介導修飾LDL(包括氧化LDL和,-VLDL)從血液循環(huán)中清除。,LDL受體：各種脂蛋白受體功能殘粒受體：清道夫受體：,（五）膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白,定義：,血漿中脂蛋白部分含有一種特殊的轉(zhuǎn)運蛋白，能促進血漿各脂蛋白間膽固醇酯、甘油三酯和磷脂的單向或雙向轉(zhuǎn)運和交換，這類特殊轉(zhuǎn)運蛋白稱脂質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白（lipid transfer protein,LTP）。,組成：,膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白（cholesterol ester transfer protein,CETP）,磷脂轉(zhuǎn)運蛋白（phospholipid transfer protein,PTP）,甘油三酯轉(zhuǎn)運蛋白（triglyceride transfer protein,TTP）,（五）膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白定義：血漿中脂蛋白部分含有一種,(六)血漿脂蛋白代謝,分類：,外源性代謝途徑：,指食物中攝入的膽固醇和甘油三酯在,小腸中合成CM及CM代謝的過程,。,內(nèi)源性代謝途徑：,指,肝臟合成VLDL，然后轉(zhuǎn)變?yōu)镮DL和,LDL，并被肝臟或其它器官代謝的過程,膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運：,HDL參與將膽固醇從外周組織運輸?shù)礁闻K的過程。,(六)血漿脂蛋白代謝分類：外源性代謝途徑：指食物中攝入的膽固,血脂和血漿脂蛋白檢驗醫(yī)學知識課件,血脂和血漿脂蛋白檢驗醫(yī)學知識課件,血脂和血漿脂蛋白檢驗醫(yī)學知識課件,二、脂蛋白代謝紊亂,（一）高脂蛋白血癥,定義：,高脂血癥（hyperlipidemia）是指血漿中膽固醇或/和甘油三,酯水平升高。血漿脂類以血漿脂蛋白形式存在，因此，高脂血癥一,定時高脂蛋白血癥（hyperlipoproteinemia）。,近年來，已逐漸認識到血漿中HDL降低也是一種脂代謝紊亂。,二、脂蛋白代謝紊亂（一）高脂蛋白血癥定義：高脂血癥（,血脂和血漿脂蛋白檢驗醫(yī)學知識課件,血脂和血漿脂蛋白檢驗醫(yī)學知識課件,分類：,1表型分型法,主要是基于各種血漿脂蛋白升高的程度不同而進行分型。該分類法不包括病因?qū)W，故稱表型分類。,（1）型高脂蛋白血癥：又稱家族性高乳糜微粒血癥,（2）a型高脂白血癥,（3）b型高脂蛋白血癥：,（4）型高脂蛋白血癥,（5）型高脂蛋白血癥,（6）型高脂蛋白血癥,分類：1表型分型法 主要是基于各種血漿脂蛋白升高,血脂和血漿脂蛋白檢驗醫(yī)學知識課件,2按是否繼發(fā)于全身性疾病分類,繼發(fā)性高脂血癥：,原發(fā)性：,繼發(fā)性者由一些全身性疾病引起血脂異常，如糖尿病、腎病綜合征、腎功能衰竭、甲狀腺功能減退癥、肝膽疾病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、肥胖癥、飲酒等。此外，某些藥物如-受體阻斷劑、降壓藥等也可引起血脂異常。,在排除繼發(fā)性高脂血癥后，可診斷為原發(fā)性。已知部分原發(fā)性高脂血癥由先天性基因缺陷所致,2按是否繼發(fā)于全身性疾病分類 原發(fā)性：繼發(fā)性者由一,3高脂血癥的基因分型法,表10-5 家族性高脂血癥的臨床特征,常 用 名,基因缺陷,臨床特征,表型分類,家族性高膽固醇血癥,L LDL受體缺陷,以膽固醇升高為主，可伴輕度甘油三酯升高，LDL明顯增加，可有肌腱黃色瘤，多有冠心病和高脂血癥家族史。,a,b,家族性Apo B,100,缺陷癥,ApoB,100,缺陷,同上,同上,家族性混合型高脂血癥,不清楚,膽固醇和甘油三酯均升高，VLDL和LDL都增加，無黃色瘤，家族成員中有不同型高脂蛋白血癥，有冠心病家族史。,b,家族性異常脂蛋白血癥,ApoE異常,膽固醇和甘油三酯均升高，乳糜微粒和VLDL殘粒以及IDL明顯增加，可有掌皺黃色瘤，多為Apo E2（2/2）表型。,家族性高甘油三酯血癥,不清楚,以甘油三酯升高為主，可有輕度膽固醇升高，VLDL明顯增加。,3高脂血癥的基因分型法 表10-5 家族性高脂血癥的臨,(二)低脂蛋白血癥,1家族性低-脂蛋白血癥,2-脂蛋白缺乏血癥,3家族性低-脂蛋白血癥,4 Tangier病,(二)低脂蛋白血癥1家族性低-脂蛋白血癥2-脂蛋白,第二節(jié) 血脂、脂蛋白及載脂蛋白測定,目前臨床上開展的血脂測定項目包括TC、TG、HDL及其亞類膽固醇、LDL-C、Lp（a）以及部分載脂蛋白如ApoAI、ApoB等。其中,TC、TG、HDL-C、LDL-C,測定是血脂測定的四個基本指標。血漿4冰箱中過夜觀察其分層現(xiàn)象及清澈度可初步估計各種脂蛋白的變化狀況。血漿脂蛋白電泳結合TC、TG水平有助于高脂血癥分型。,概況：,第二節(jié) 血脂、脂蛋白及載脂蛋白測定 目前臨床上開展的,血脂測定標準化：,血脂分析前變異來源于：,生物因素，如年齡、性別、種族等因素的個體差異。,生活方式，包括飲食習慣、吸煙、運動及應激等。,臨床方面包括疾病或藥物引起的脂代謝改變。,血標本采集與處理方面,準確測定應從分析前的準備開始，包括受試者的準備，標本,采集，合格的試劑、校準物的選用，檢測方法選擇。,方法學上應該采用美國疾病控制中心（CDC）或中華醫(yī)學會檢驗分會推薦的操作方法。,血脂測定標準化：血脂分析前變異來源于：準確測定應從分析前的準,一、血清（漿）靜置試驗,將患者空腹12h后采集靜脈血分離出血清置4冰箱中過夜，然后觀察其分層現(xiàn)象及清澈度。,空腹血清混濁，表示TG升高，可放在4冰箱過夜后進一步觀察，如果上層出現(xiàn)奶油樣且下層清澈，表明CM升高，VLDL正常，可能為I型高脂血癥。如果上層出現(xiàn)奶油樣且下層混濁，表明CM及VLDL均升高，可能是V型。空腹血清混濁，4冰箱中過夜后仍為均勻混濁，表明VLDL升高，此時應進一步測定TC，TC升高者可能是III或IIb型而TC正常者則可能為型。IIa型高脂血癥血清也清澈透明。,正?？崭寡鍛宄和该鳌?一、血清（漿）靜置試驗 將患者空腹12h后采集靜脈血分,二、血清（漿）總膽固醇測定,化學法,酶法,二、血清（漿）總膽固醇測定化學法酶法,（一）化學測定法,化學測定法通常需,抽提純化,。顯色劑主要有兩類：,醋酸-醋酐-硫酸,高鐵硫酸。,這些顯色反應須用強酸試劑，干擾因素多，準確,測定有賴于從標本中抽提、皂化、純化過程，因而操,作較繁，不適于分析大批量標本，且不適于自動分析。,特點：,（一）化學測定法 化學測定法通常需抽提純化。顯色劑主要,1Liberman-Burchard反應,1885年Liberman發(fā)現(xiàn)膽固醇在硫酸、醋酐溶液中顯色，1890年Burchard用此反應測定膽固醇稱為L-B反應。,1953年Zak提出用硫酸、醋酸和Fe3+等與膽固醇作用生成紫紅色化合物來測定膽固醇，稱為Zak反應。,2Zak反應,1Liberman-Burchard反應 188,(二)酶測定法,特點：,常規(guī)測定中現(xiàn)已廣泛應用酶法，酶法具有特異性好，精密度和靈敏度都能很好地滿足臨床實驗室的要求，既可以手工操作，也適合自動分析，但酶法測定中出現(xiàn)了不同程度的,基質(zhì)效應。,采用酶反應原理的干化學法頗為實用，其缺點是價格高，精密度差。膽固醇的酶測定法始于70年代。由于操作簡便，試劑無腐蝕性，特別適用于自動生化分析，,目前已成為測定膽固醇的主要方法。,(二)酶測定法特點：常規(guī)測定中現(xiàn)已廣泛應用酶法，酶法,CEH-COD-PAP法,原理：,CEH,2,O FCFFA,FCO,2,4-膽甾烯酮H,2,O,2,H,2,O,2,4-AAP酚 醌亞胺H,2,O,膽固醇酶