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1、 第四章第四章 革蘭氏陰性需氧桿菌革蘭氏陰性需氧桿菌 布氏桿菌布氏桿菌又名布魯氏菌又名布魯氏菌 ,1887,1887年年BruceBruce從死從死亡士兵脾臟中分到第一株布魯菌，可引起亡士兵脾臟中分到第一株布魯菌，可引起多種動(dòng)物發(fā)病。主要寄居于肝、脾和淋巴多種動(dòng)物發(fā)病。主要寄居于肝、脾和淋巴組織內(nèi)的單核細(xì)胞中，是胞內(nèi)寄生菌。組織內(nèi)的單核細(xì)胞中，是胞內(nèi)寄生菌。布氏桿菌屬（布氏桿菌屬（Brucella）革蘭氏陰性需氧桿菌課件p主要侵害：主要侵害：生殖器官和關(guān)節(jié)生殖器官和關(guān)節(jié)p主要特征是：主要特征是：生殖器官、胎膜以及生殖器官、胎膜以及多種器官組織發(fā)炎、壞死和肉芽腫的多種器官組織發(fā)炎、壞死和肉芽腫的

2、形成形成，引起流產(chǎn)、不孕、睪丸及關(guān)節(jié)，引起流產(chǎn)、不孕、睪丸及關(guān)節(jié)炎癥等癥狀。炎癥等癥狀。p人類接觸帶菌動(dòng)物或食用病畜及其人類接觸帶菌動(dòng)物或食用病畜及其乳制品，均可被感染。乳制品，均可被感染。革蘭氏陰性需氧桿菌課件一、形態(tài)及染色特性一、形態(tài)及染色特性 球形、球桿形或短桿形，球形、球桿形或短桿形，新分離者趨向球形。多單新分離者趨向球形。多單在，不形成芽胞和莢膜在，不形成芽胞和莢膜，無鞭毛不運(yùn)動(dòng)。革蘭氏染無鞭毛不運(yùn)動(dòng)。革蘭氏染色陰性色陰性，但著色不佳。柯，但著色不佳?？缕澚_夫染色法染成紅色，茲羅夫染色法染成紅色，其他菌呈綠色或藍(lán)色。其他菌呈綠色或藍(lán)色。革蘭氏陰性需氧桿菌課件 二、培養(yǎng)特性二、培養(yǎng)特性

3、 n本菌本菌專性需氧專性需氧，在初代分離培養(yǎng)時(shí)尚需，在初代分離培養(yǎng)時(shí)尚需5%-10%CO5%-10%CO2 2，泛酸鈣和，泛酸鈣和 內(nèi)消旋赤蘚糖醇可刺激某些菌株生長。內(nèi)消旋赤蘚糖醇可刺激某些菌株生長。在培養(yǎng)基中加入少量血液、在培養(yǎng)基中加入少量血液、血清或肝浸液可促進(jìn)生長，血清或肝浸液可促進(jìn)生長，不溶血不溶血。生長緩慢生長緩慢，常需，常需5-10d甚至甚至 20-30d。n液體培養(yǎng)基上呈輕微渾濁生長，時(shí)間長可液體培養(yǎng)基上呈輕微渾濁生長，時(shí)間長可形成很厚的菌膜形成很厚的菌膜；在固體在固體 培養(yǎng)基上有培養(yǎng)基上有S、M、R型菌落，大小不一。型菌落，大小不一。革蘭氏陰性需氧桿菌課件 三、抗原性及變異性三

4、、抗原性及變異性（一）屬內(nèi)抗原（一）屬內(nèi)抗原 ：A A、M M、R R抗原抗原v光滑型布氏桿菌有光滑型布氏桿菌有A和和M二種菌體抗原成分二種菌體抗原成分(外露的多糖側(cè)鏈），是外露的多糖側(cè)鏈），是 細(xì)菌的凝集抗原，各菌種含量不同。與細(xì)菌的凝集抗原，各菌種含量不同。與S型菌發(fā)生交叉凝集。型菌發(fā)生交叉凝集。vR抗原：非抗原：非S型菌的共同抗原，不與型菌的共同抗原，不與S型菌發(fā)生凝集。型菌發(fā)生凝集。v變異變異：SR SR 喪失喪失A A、M M抗原，暴露抗原，暴露R R抗原抗原（二）屬外抗原（二）屬外抗原 可與巴氏桿菌、變形桿菌、大腸桿菌等屬細(xì)菌發(fā)生交叉凝集反應(yīng)?？膳c巴氏桿菌、變形桿菌、大腸桿菌等屬細(xì)

5、菌發(fā)生交叉凝集反應(yīng)。革蘭氏陰性需氧桿菌課件 1）A抗原與抗原與M抗原抗原v是細(xì)胞壁表面的是細(xì)胞壁表面的脂多糖蛋白脂多糖蛋白復(fù)合物復(fù)合物。v光滑型布氏桿菌光滑型布氏桿菌具有具有A和和M兩種表面抗兩種表面抗原，原，兩者含量有差異兩者含量有差異（約（約1：20），流產(chǎn)），流產(chǎn)布氏桿菌以布氏桿菌以A為主，為主，馬爾他布氏桿菌馬爾他布氏桿菌以以M抗原為主，分別能與相應(yīng)的抗原為主，分別能與相應(yīng)的單項(xiàng)抗血清單項(xiàng)抗血清表表現(xiàn)凝集反應(yīng)。現(xiàn)凝集反應(yīng)。v豬豬布氏桿菌布氏桿菌兩種抗原含量相近兩種抗原含量相近，可凝集，可凝集兩種單相抗血清。因此，可用凝集試驗(yàn)鑒兩種單相抗血清。因此，可用凝集試驗(yàn)鑒別種和生物型別種和生物型

6、革蘭氏陰性需氧桿菌課件 2）R抗原抗原v為細(xì)胞壁中的脂多糖復(fù)合物。為細(xì)胞壁中的脂多糖復(fù)合物。v是大多數(shù)是大多數(shù)非光滑型布氏桿菌非光滑型布氏桿菌的共同抗原決的共同抗原決定簇，定簇，其抗血清可與綿羊種和犬種布氏桿菌其抗血清可與綿羊種和犬種布氏桿菌凝集凝集v光滑型菌株發(fā)生光滑型菌株發(fā)生S到到R的變異的變異后，后，喪失喪失A和和M抗原抗原后，暴露出后，暴露出R抗原，可與抗原，可與R抗血清發(fā)生抗血清發(fā)生凝集。凝集。綿羊種和犬種布氏桿菌是綿羊種和犬種布氏桿菌是天然的天然的R型種型種，其他種為，其他種為S型。型。革蘭氏陰性需氧桿菌課件2、屬外抗原、屬外抗原是指是指布氏桿菌布氏桿菌能與能與巴氏桿菌、變形桿菌、

7、巴氏桿菌、變形桿菌、弗朗西斯桿菌、弧菌、彎曲菌、鉤端螺弗朗西斯桿菌、弧菌、彎曲菌、鉤端螺旋體、假單胞菌、沙門氏菌、耶耳森菌旋體、假單胞菌、沙門氏菌、耶耳森菌和大腸桿菌和大腸桿菌等屬的細(xì)菌發(fā)生交叉反應(yīng)的等屬的細(xì)菌發(fā)生交叉反應(yīng)的抗原抗原。革蘭氏陰性需氧桿菌課件五、變異性五、變異性1、布氏桿菌布氏桿菌最常見的變異是最常見的變異是SR變異變異，此種變異很少發(fā)生回變此種變異很少發(fā)生回變2、發(fā)生發(fā)生SR變異后，細(xì)菌特異性多糖鏈變異后，細(xì)菌特異性多糖鏈發(fā)生改變，喪失發(fā)生改變，喪失A和和M抗原?？乖?、變異細(xì)菌變異細(xì)菌毒力減弱毒力減弱，凝集原性較差，凝集原性較差，對(duì)吞噬細(xì)胞缺乏抵抗力，同時(shí)易于發(fā)生自對(duì)吞噬細(xì)

8、胞缺乏抵抗力，同時(shí)易于發(fā)生自凝現(xiàn)象。凝現(xiàn)象。革蘭氏陰性需氧桿菌課件 四、種及致病性四、種及致病性（一）分類（一）分類 6個(gè)種個(gè)種 v馬耳他布氏桿菌馬耳他布氏桿菌Br.melitensis（羊型）（羊型）1-3v 流產(chǎn)布氏桿菌流產(chǎn)布氏桿菌Br.abortus（牛型）（牛型）1-9v 豬布氏桿菌豬布氏桿菌Br.suis 1-5v 綿羊布氏桿菌綿羊布氏桿菌Br.ovisv 沙林鼠布氏桿菌沙林鼠布氏桿菌 Br.neotomaev 犬布氏桿菌犬布氏桿菌 Br.canis革蘭氏陰性需氧桿菌課件q其中其中1、2、3三個(gè)種危害最大，我國流行的也主要三個(gè)種危害最大，我國流行的也主要是這三種，其中以羊布氏桿菌病最

9、為多見。是這三種，其中以羊布氏桿菌病最為多見。：羊種羊種天然感染羊，天然感染羊，豬種豬種天然感染豬，天然感染豬，牛種牛種感染牛感染牛但但1、2、3可以互相感染，同時(shí)對(duì)人、馬等動(dòng)物都能可以互相感染，同時(shí)對(duì)人、馬等動(dòng)物都能致病，致病，人類感染以羊種最多見，且毒力最強(qiáng)，豬種次之，人類感染以羊種最多見，且毒力最強(qiáng)，豬種次之，牛種最弱牛種最弱革蘭氏陰性需氧桿菌課件q布氏桿菌可通過布氏桿菌可通過胎盤、羊水、流產(chǎn)胎兒、胎盤、羊水、流產(chǎn)胎兒、乳汁、陰道分泌物、精液等排出體乳汁、陰道分泌物、精液等排出體外，外，q通過皮膚、傷口、消化道、呼吸道、眼通過皮膚、傷口、消化道、呼吸道、眼結(jié)膜、交配等途徑感染。結(jié)膜、交配

10、等途徑感染。革蘭氏陰性需氧桿菌課件v主要致病物質(zhì)有主要致病物質(zhì)有內(nèi)毒素、莢膜和透明質(zhì)酸酶內(nèi)毒素、莢膜和透明質(zhì)酸酶。侵襲力強(qiáng)，。侵襲力強(qiáng)，可通過完整的皮膚、粘膜進(jìn)入體內(nèi)，并有很強(qiáng)的繁殖與可通過完整的皮膚、粘膜進(jìn)入體內(nèi)，并有很強(qiáng)的繁殖與 擴(kuò)散能力。擴(kuò)散能力。v動(dòng)物體內(nèi)常局限于腺體組織與生殖器官（與赤蘚醇含量動(dòng)物體內(nèi)常局限于腺體組織與生殖器官（與赤蘚醇含量 較高有關(guān)），故病畜主要表現(xiàn)為睪丸炎、附睪炎、乳腺較高有關(guān)），故病畜主要表現(xiàn)為睪丸炎、附睪炎、乳腺 炎、子宮炎等。孕期動(dòng)物對(duì)布氏桿菌最敏感，感染后常炎、子宮炎等。孕期動(dòng)物對(duì)布氏桿菌最敏感，感染后常 引起流產(chǎn)。引起流產(chǎn)。（二）致病性（二）致病性革蘭氏

11、陰性需氧桿菌課件v細(xì)菌學(xué)檢查：細(xì)菌學(xué)檢查：柯茲羅夫斯基染色?？缕澚_夫斯基染色。v血清學(xué)檢查：血清學(xué)檢查：用已知的布氏桿菌檢查動(dòng)物的血清抗體用已知的布氏桿菌檢查動(dòng)物的血清抗體 凝集試驗(yàn)（虎紅平板凝集試驗(yàn)）凝集試驗(yàn)（虎紅平板凝集試驗(yàn)）感染初期檢測(cè)。大動(dòng)物血清凝集價(jià)達(dá)感染初期檢測(cè)。大動(dòng)物血清凝集價(jià)達(dá)1：100時(shí)陽性，時(shí)陽性，1：25可疑；小動(dòng)物可疑；小動(dòng)物1：50為陽性，為陽性，1：25為可疑。為可疑。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 慢性布氏桿菌病診斷。規(guī)定慢性布氏桿菌病診斷。規(guī)定1：10被檢血清阻止溶血被檢血清阻止溶血 在在50%以上即陽性。以上即陽性。v變態(tài)反應(yīng)檢測(cè)變態(tài)反應(yīng)檢測(cè) 不宜作早期診斷。布氏桿

12、菌水解素注射，觀察紅腫反不宜作早期診斷。布氏桿菌水解素注射，觀察紅腫反 應(yīng)。應(yīng)。1-2cm為弱為弱+；2-3cm為為+；4-6cm為強(qiáng)為強(qiáng)+。五、微生物學(xué)診斷五、微生物學(xué)診斷革蘭氏陰性需氧桿菌課件微生物學(xué)診斷微生物學(xué)診斷n布氏桿菌病常表現(xiàn)為慢性或隱性感染，其診布氏桿菌病常表現(xiàn)為慢性或隱性感染，其診斷和檢疫主要依靠斷和檢疫主要依靠血清學(xué)檢查血清學(xué)檢查及及變態(tài)反應(yīng)檢變態(tài)反應(yīng)檢查，查，細(xì)菌學(xué)檢查僅用于發(fā)生流產(chǎn)的動(dòng)物和其細(xì)菌學(xué)檢查僅用于發(fā)生流產(chǎn)的動(dòng)物和其他特殊情況。他特殊情況。n發(fā)達(dá)國家規(guī)定發(fā)達(dá)國家規(guī)定 凡涉及本菌凡涉及本菌樣本檢測(cè)樣本檢測(cè)應(yīng)在生物安全應(yīng)在生物安全2 2級(jí)實(shí)級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行驗(yàn)室進(jìn)行涉及涉及

13、本菌培養(yǎng)本菌培養(yǎng)則需在生物安全則需在生物安全3 3級(jí)實(shí)驗(yàn)室級(jí)實(shí)驗(yàn)室操作操作革蘭氏陰性需氧桿菌課件分分離離培培養(yǎng)養(yǎng)直接涂片、柯氏與革蘭氏染色、顯微鏡檢直接涂片、柯氏與革蘭氏染色、顯微鏡檢含菌量少的病料用含菌量少的病料用肝湯或胰化酪蛋白肝湯或胰化酪蛋白大豆胨液增菌大豆胨液增菌肝湯瓊脂肝湯瓊脂或胰化酪或胰化酪蛋白大豆蛋白大豆瓊脂或血瓊脂或血平板直接平板直接劃線劃線純純培培養(yǎng)養(yǎng)生化生化試驗(yàn)試驗(yàn)血清學(xué)血清學(xué)試驗(yàn)試驗(yàn)種及生物種及生物型的鑒定型的鑒定陽陽性性者者動(dòng)物試驗(yàn)，豚鼠最易感，小鼠和家兔有低抗力動(dòng)物試驗(yàn)，豚鼠最易感，小鼠和家兔有低抗力病料病料（一）細(xì)菌學(xué)診斷（一）細(xì)菌學(xué)診斷鑒定程序如下鑒定程序如下革蘭

14、氏陰性需氧桿菌課件最好用流產(chǎn)胎兒的胃內(nèi)容物、肺、肝最好用流產(chǎn)胎兒的胃內(nèi)容物、肺、肝和脾以及流產(chǎn)胎盤和羊水等。和脾以及流產(chǎn)胎盤和羊水等。也可采用陰道分泌物、乳汁、血液、也可采用陰道分泌物、乳汁、血液、精液、尿液以及急宰病畜的子宮、乳房、精液、尿液以及急宰病畜的子宮、乳房、精囊、睪丸、附睪、淋巴結(jié)、骨髓和其精囊、睪丸、附睪、淋巴結(jié)、骨髓和其他與局部病變的器官。他與局部病變的器官。1 1、病料的采集及顯微鏡檢查、病料的采集及顯微鏡檢查 革蘭氏陰性需氧桿菌課件病料直接涂片，作病料直接涂片，作革蘭氏和柯茲洛革蘭氏和柯茲洛夫斯基染色鏡檢。夫斯基染色鏡檢。若發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性、鑒別染色為若發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性、鑒別染

15、色為紅紅色的球狀桿菌或短小桿菌色的球狀桿菌或短小桿菌，即可作出，即可作出初步疑似診斷初步疑似診斷革蘭氏陰性需氧桿菌課件2、分離培養(yǎng)鑒定、分離培養(yǎng)鑒定加有放線菌酮加有放線菌酮0.1mg/ml、桿菌肽、桿菌肽25IU/ml、多黏菌素、多黏菌素B 6IU/ml和加和加有色素的選擇性瓊脂平板。有色素的選擇性瓊脂平板。無污染病料無污染病料肝湯瓊脂或胰化肝湯瓊脂或胰化酪蛋白大豆瓊脂酪蛋白大豆瓊脂或血平板或血平板污染病料污染病料含菌數(shù)量較少的病料含菌數(shù)量較少的病料增菌培養(yǎng)增菌培養(yǎng)每每3d觀察觀察1次，如有細(xì)菌生長，可挑選可次，如有細(xì)菌生長，可挑選可疑菌落細(xì)菌鑒定。如無細(xì)菌生長，可繼疑菌落細(xì)菌鑒定。如無細(xì)菌生

16、長，可繼續(xù)培養(yǎng)到續(xù)培養(yǎng)到30d，仍無生長者可認(rèn)為陰性。，仍無生長者可認(rèn)為陰性。兩套培養(yǎng)兩套培養(yǎng)大氣環(huán)境大氣環(huán)境5-10CO2環(huán)境，環(huán)境，37培養(yǎng)培養(yǎng)革蘭氏陰性需氧桿菌課件挑取可疑菌落，做涂片、染色和鏡檢，挑取可疑菌落，做涂片、染色和鏡檢，確定為疑似菌后進(jìn)行純培養(yǎng)，確定為疑似菌后進(jìn)行純培養(yǎng)，以布氏桿菌抗血清做玻板凝集試驗(yàn)，以布氏桿菌抗血清做玻板凝集試驗(yàn)，以上兩相試驗(yàn)結(jié)果并結(jié)合菌落特征以上兩相試驗(yàn)結(jié)果并結(jié)合菌落特征，可做出布氏桿菌的診斷可做出布氏桿菌的診斷革蘭氏陰性需氧桿菌課件若動(dòng)物一直未發(fā)病死亡，可于接種后若動(dòng)物一直未發(fā)病死亡，可于接種后5周周左右撲殺豚鼠，進(jìn)行同樣檢查。左右撲殺豚鼠，進(jìn)行同樣檢

17、查。3、動(dòng)物試驗(yàn)、動(dòng)物試驗(yàn)病料乳懸液病料乳懸液豚鼠豚鼠腹腔或鼠蹊部皮下注射每只12m1，（1）每隔）每隔7l0d采血采血檢查血清抗檢查血清抗體體，如凝集價(jià)達(dá)，如凝集價(jià)達(dá)到到1：50以上，以上，即認(rèn)為感染了布即認(rèn)為感染了布魯氏菌。魯氏菌。（2）皮膚）皮膚過敏試驗(yàn)進(jìn)過敏試驗(yàn)進(jìn)行診斷。行診斷。（3）動(dòng)物發(fā)?。﹦?dòng)物發(fā)病死亡后，剖檢取死亡后，剖檢取肝、脾、淋巴結(jié)肝、脾、淋巴結(jié)及少許骨髓，進(jìn)及少許骨髓，進(jìn)行細(xì)菌檢查和分行細(xì)菌檢查和分離。離。革蘭氏陰性需氧桿菌課件血清中布氏桿菌抗體檢查血清中布氏桿菌抗體檢查病料中布氏桿菌檢查兩類方法。病料中布氏桿菌檢查兩類方法。（二）血清學(xué)檢查（二）血清學(xué)檢查有多種檢查方法

18、有多種檢查方法歸納起來歸納起來動(dòng)物在感染布氏桿菌動(dòng)物在感染布氏桿菌715d可出現(xiàn)抗可出現(xiàn)抗體，體，檢測(cè)血清中的抗體是布氏桿菌檢測(cè)血清中的抗體是布氏桿菌病診斷和檢疫的病診斷和檢疫的主要手段主要手段。革蘭氏陰性需氧桿菌課件 大規(guī)模檢疫時(shí)可采用大規(guī)模檢疫時(shí)可采用操作較簡便操作較簡便的的方法進(jìn)行初步篩選方法進(jìn)行初步篩選(初篩試驗(yàn)初篩試驗(yàn))，然后再，然后再用用準(zhǔn)確性較高方法予以復(fù)核準(zhǔn)確性較高方法予以復(fù)核(確定試驗(yàn)確定試驗(yàn))。革蘭氏陰性需氧桿菌課件抗球蛋白試驗(yàn)抗球蛋白試驗(yàn)琉基乙醇凝集試驗(yàn)琉基乙醇凝集試驗(yàn)瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)或酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等或酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等國內(nèi)常用國內(nèi)常用玻板凝集試驗(yàn)玻板凝集試驗(yàn)

19、虎紅平板凝集試驗(yàn)虎紅平板凝集試驗(yàn)乳汁環(huán)狀試驗(yàn)乳汁環(huán)狀試驗(yàn)現(xiàn)場(chǎng)或牧區(qū)現(xiàn)場(chǎng)或牧區(qū)大群檢疫大群檢疫試管凝集試驗(yàn)試管凝集試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室最后確診實(shí)驗(yàn)室最后確診作為疑難的病例作為疑難的病例輔助診斷方法輔助診斷方法。革蘭氏陰性需氧桿菌課件判斷標(biāo)準(zhǔn)判斷標(biāo)準(zhǔn)（1）牛、馬、駱駝等大動(dòng)物血清牛、馬、駱駝等大動(dòng)物血清凝集價(jià)凝集價(jià)(或玻板試驗(yàn)中相當(dāng)?shù)哪瘍r(jià)或玻板試驗(yàn)中相當(dāng)?shù)哪瘍r(jià))達(dá)：達(dá)：1：100時(shí)判為陽性時(shí)判為陽性1：50為可疑為可疑（2）羊、豬、狗等血清凝集價(jià)羊、豬、狗等血清凝集價(jià)1：50為陽性為陽性1：25為可疑。為可疑。（3）人血清凝集價(jià)人血清凝集價(jià)1：100時(shí)為陽性。時(shí)為陽性。革蘭氏陰性

20、需氧桿菌課件p皮膚變態(tài)反應(yīng)一般在感染后的皮膚變態(tài)反應(yīng)一般在感染后的2025d出現(xiàn)，因此出現(xiàn)，因此不宜作早期診斷不宜作早期診斷。本。本法適于動(dòng)物的大群檢疫，主要用于法適于動(dòng)物的大群檢疫，主要用于綿羊和山羊，其次為豬。綿羊和山羊，其次為豬。（三）變態(tài)反應(yīng)檢查（三）變態(tài)反應(yīng)檢查革蘭氏陰性需氧桿菌課件p感染初期階段感染初期階段，凝集反應(yīng)常為陽性，凝集反應(yīng)常為陽性，補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)或?yàn)殛栃曰驗(yàn)殛幮?，變態(tài)補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)或?yàn)殛栃曰驗(yàn)殛幮裕儜B(tài)反應(yīng)則為反應(yīng)則為陰性陰性。p到晚期慢性或恢復(fù)階段到晚期慢性或恢復(fù)階段，則凝集反應(yīng)，則凝集反應(yīng)與補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)均轉(zhuǎn)為陰性，僅變態(tài)反與補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)均轉(zhuǎn)為陰性，僅變態(tài)反應(yīng)呈現(xiàn)應(yīng)呈現(xiàn)陽

21、性陽性。p因此，為了徹底消除各類病畜，應(yīng)同因此，為了徹底消除各類病畜，應(yīng)同時(shí)使用時(shí)使用三種方法進(jìn)行綜合診斷三種方法進(jìn)行綜合診斷。革蘭氏陰性需氧桿菌課件六、抵抗力六、抵抗力1、對(duì)外界環(huán)境的對(duì)外界環(huán)境的抵抗力較強(qiáng)抵抗力較強(qiáng)，在污染的土在污染的土壤和水中可存活壤和水中可存活1-4個(gè)月，皮毛個(gè)月，皮毛2-4個(gè)月，乳、個(gè)月，乳、肉食品中約肉食品中約2個(gè)月，糞便中個(gè)月，糞便中120d，流產(chǎn)胎兒，流產(chǎn)胎兒中至少中至少75d，子宮滲出物中，子宮滲出物中200d。2、對(duì)濕熱的抵抗力不強(qiáng)、對(duì)濕熱的抵抗力不強(qiáng)，60加熱加熱30min或或70 5min即殺死，煮沸立即死亡。即殺死，煮沸立即死亡。3、對(duì)消毒劑的抵抗力也

22、不強(qiáng)。、對(duì)消毒劑的抵抗力也不強(qiáng)。革蘭氏陰性需氧桿菌課件臨床表現(xiàn) 布魯氏菌的主要臨床表現(xiàn)與生殖道有關(guān)，一般情況下，布魯氏菌的主要臨床表現(xiàn)與生殖道有關(guān)，一般情況下，動(dòng)物動(dòng)物 不表現(xiàn)明顯的全身性疾病。在雌性動(dòng)物，流產(chǎn)是最不表現(xiàn)明顯的全身性疾病。在雌性動(dòng)物，流產(chǎn)是最普遍的表現(xiàn)，沒有預(yù)兆的癥狀通常是明顯的。對(duì)于公畜，普遍的表現(xiàn)，沒有預(yù)兆的癥狀通常是明顯的。對(duì)于公畜，附睪炎和睪丸炎是最普遍的癥狀，損傷通常是單側(cè)的，但附睪炎和睪丸炎是最普遍的癥狀，損傷通常是單側(cè)的，但也可能是雙側(cè)的。公畜生殖道的感染導(dǎo)致生育降低，在一也可能是雙側(cè)的。公畜生殖道的感染導(dǎo)致生育降低，在一些情況下，導(dǎo)致不育。些情況下，導(dǎo)致不育。生

23、殖生殖 道外癥狀表現(xiàn)在許多動(dòng)物種類。感染豬布魯氏道外癥狀表現(xiàn)在許多動(dòng)物種類。感染豬布魯氏菌的豬可能發(fā)展為關(guān)節(jié)炎，尤其在肢體的大關(guān)節(jié)或腰部脊菌的豬可能發(fā)展為關(guān)節(jié)炎，尤其在肢體的大關(guān)節(jié)或腰部脊椎。腰部脊椎的損傷導(dǎo)致在脊髓加壓的組織壞死，并且導(dǎo)椎。腰部脊椎的損傷導(dǎo)致在脊髓加壓的組織壞死，并且導(dǎo)致后來的癱瘓。感染了犬布魯氏菌的狗能夠發(fā)生腦膜炎、致后來的癱瘓。感染了犬布魯氏菌的狗能夠發(fā)生腦膜炎、骨髓炎和眼色素層炎。骨髓炎和眼色素層炎。革蘭氏陰性需氧桿菌課件 人的布魯氏菌病主要是一種網(wǎng)狀內(nèi)皮系人的布魯氏菌病主要是一種網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)疾病。可能出現(xiàn)一種溫和的淋巴結(jié)病統(tǒng)疾病。可能出現(xiàn)一種溫和的淋巴結(jié)病，脾腫大和肝

24、腫大。在暴露后的，脾腫大和肝腫大。在暴露后的23周周，開始出現(xiàn)癥狀。臨床癥狀是非特異的，開始出現(xiàn)癥狀。臨床癥狀是非特異的，并且包括間歇性發(fā)熱和盜汗的寒戰(zhàn)，并且包括間歇性發(fā)熱和盜汗的寒戰(zhàn)，疲勞、肌肉和關(guān)節(jié)痛、背痛，壓抑和失疲勞、肌肉和關(guān)節(jié)痛、背痛，壓抑和失眠是普遍的。感染的特異性臨床表現(xiàn)包眠是普遍的。感染的特異性臨床表現(xiàn)包括關(guān)節(jié)炎、骨髓炎和心內(nèi)膜炎。括關(guān)節(jié)炎、骨髓炎和心內(nèi)膜炎。革蘭氏陰性需氧桿菌課件九、免疫防治九、免疫防治 目前研究認(rèn)為目前研究認(rèn)為,在絕大多數(shù)情況下在絕大多數(shù)情況下,使用疫苗使用疫苗是控制牛、羊布病的有效方法。由于布氏桿菌主是控制牛、羊布病的有效方法。由于布氏桿菌主要為胞內(nèi)寄生要

25、為胞內(nèi)寄生,抗生素對(duì)其效果甚微抗生素對(duì)其效果甚微,機(jī)體的細(xì)胞機(jī)體的細(xì)胞免疫對(duì)抑制該病起了至關(guān)重要的作用。因此對(duì)布免疫對(duì)抑制該病起了至關(guān)重要的作用。因此對(duì)布氏桿菌病疫苗的研究主要集中在篩選弱毒株氏桿菌病疫苗的研究主要集中在篩選弱毒株,構(gòu)建構(gòu)建突變株以及尋找亞單位疫苗等方面突變株以及尋找亞單位疫苗等方面。布氏桿菌的控制和預(yù)防手段依賴于所涉及的布氏桿菌的控制和預(yù)防手段依賴于所涉及的動(dòng)物種、布魯氏菌種、管理習(xí)慣、疫苗的利用和動(dòng)物種、布魯氏菌種、管理習(xí)慣、疫苗的利用和有效性。有效性。革蘭氏陰性需氧桿菌課件假單胞菌屬假單胞菌屬一、鼻疽假單胞菌一、鼻疽假單胞菌（一）致病性（一）致病性引起馬、驢、騾、單蹄獸的

26、鼻疽，也感染人和其它家引起馬、驢、騾、單蹄獸的鼻疽，也感染人和其它家畜。病變特征為皮膚、鼻腔粘膜、肺臟及其他實(shí)質(zhì)器畜。病變特征為皮膚、鼻腔粘膜、肺臟及其他實(shí)質(zhì)器官形成典型的鼻疽結(jié)節(jié)和潰瘍。官形成典型的鼻疽結(jié)節(jié)和潰瘍。strassstrass反應(yīng)反應(yīng)：當(dāng)接種細(xì)菌于雄性豚鼠腹腔后，可引起：當(dāng)接種細(xì)菌于雄性豚鼠腹腔后，可引起典型的睪丸炎和睪丸周圍炎，睪丸腫脹化膿而破潰稱典型的睪丸炎和睪丸周圍炎，睪丸腫脹化膿而破潰稱為為strassstrass反應(yīng)。反應(yīng)。革蘭氏陰性需氧桿菌課件（二）形態(tài)染色特征（二）形態(tài)染色特征 G G，矢直或微彎曲的中等大小桿菌，無運(yùn)矢直或微彎曲的中等大小桿菌，無運(yùn)動(dòng)性，無芽胞，無

27、莢膜。動(dòng)性，無芽胞，無莢膜。（三）培養(yǎng)特性及抗原性（了解）（三）培養(yǎng)特性及抗原性（了解）（四）微生物學(xué)診斷（四）微生物學(xué)診斷 主要采用變態(tài)反應(yīng)檢查和血清學(xué)檢查，而細(xì)主要采用變態(tài)反應(yīng)檢查和血清學(xué)檢查，而細(xì)菌學(xué)檢查具有在特殊病例中才應(yīng)用，菌學(xué)檢查具有在特殊病例中才應(yīng)用，革蘭氏陰性需氧桿菌課件1 1 變態(tài)反應(yīng)檢查：變態(tài)反應(yīng)檢查：是鼻疽診斷和檢疫的最常用方法，所用的反應(yīng)原是是鼻疽診斷和檢疫的最常用方法，所用的反應(yīng)原是鼻疽菌素（馬來因鼻疽菌素（馬來因,mallein mallein）。方法：方法：有有5 5種方法，其中以點(diǎn)眼法最常用，將鼻疽菌素種方法，其中以點(diǎn)眼法最常用，將鼻疽菌素3 3-4-4滴滴入馬

28、匹一側(cè)眼結(jié)膜囊內(nèi)，分別于點(diǎn)眼后滴滴入馬匹一側(cè)眼結(jié)膜囊內(nèi)，分別于點(diǎn)眼后3 3，6 6，9 9，1212，2424h h觀察，若眼膜紅腫并排出膿性分泌物則為觀察，若眼膜紅腫并排出膿性分泌物則為陽性反應(yīng)。陽性反應(yīng)。革蘭氏陰性需氧桿菌課件2 2血清學(xué)檢查血清學(xué)檢查 方法：方法：補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。此法特異性高，但敏感補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。此法特異性高，但敏感性不高，檢出馬匹多為活動(dòng)性，對(duì)慢性病例只檢性不高，檢出馬匹多為活動(dòng)性，對(duì)慢性病例只檢出出1010-20%-20%，所以它吸能作為對(duì)鼻疽菌素點(diǎn)眼試驗(yàn)，所以它吸能作為對(duì)鼻疽菌素點(diǎn)眼試驗(yàn)陽性動(dòng)物的附加診斷。陽性動(dòng)物的附加診斷。革蘭氏陰性需氧桿菌課件(五）免疫防治五）免

29、疫防治無疫苗：采用全面檢疫，檢出陽性補(bǔ)殺或隔離。無疫苗：采用全面檢疫，檢出陽性補(bǔ)殺或隔離。革蘭氏陰性需氧桿菌課件 偽鼻疽伯氏菌（過去叫偽鼻疽桿菌）偽鼻疽伯氏菌（過去叫偽鼻疽桿菌）引起人和動(dòng)物的類鼻疽，表現(xiàn)為急性敗引起人和動(dòng)物的類鼻疽，表現(xiàn)為急性敗血癥，但也可以是皮膚，肝臟、脾臟淋血癥，但也可以是皮膚，肝臟、脾臟淋巴結(jié)等處形成慢性的結(jié)節(jié)或膿腫病灶，巴結(jié)等處形成慢性的結(jié)節(jié)或膿腫病灶，與鼻疽相似。與鼻疽相似。革蘭氏陰性需氧桿菌課件 銅綠假單胞菌（綠膿桿菌）銅綠假單胞菌（綠膿桿菌）1 1G G極生單鞭毛，運(yùn)動(dòng)，有極生單鞭毛，運(yùn)動(dòng)，有2 2種菌落，一種為大而種菌落，一種為大而光滑邊緣平坦，中央凸起的油煎

30、蛋樣，另一種為光滑邊緣平坦，中央凸起的油煎蛋樣，另一種為小而粗糙，隆起菌落，臨床病料為大菌落，環(huán)境小而粗糙，隆起菌落，臨床病料為大菌落，環(huán)境分病離株為小菌落。多數(shù)菌產(chǎn)生水溶性綠膿素分病離株為小菌落。多數(shù)菌產(chǎn)生水溶性綠膿素（藍(lán)色）和熒光素（帶綠色熒光）。（藍(lán)色）和熒光素（帶綠色熒光）。溶血溶血革蘭氏陰性需氧桿菌課件2 2抗原性：抗原性：O O，H H，粘液抗原，粘液抗原，R R抗原抗原3 3致病性：可產(chǎn)生內(nèi)毒素，致死毒素，腸致病性：可產(chǎn)生內(nèi)毒素，致死毒素，腸毒素，溶血素，殺白細(xì)胞素，多種胞外毒素，溶血素，殺白細(xì)胞素，多種胞外酶廣泛引起各種病變。馬的流產(chǎn)和化膿酶廣泛引起各種病變。馬的流產(chǎn)和化膿性肺炎，牛的下痢，乳腺炎，肉芽腫，性肺炎，牛的下痢，乳腺炎，肉芽腫，子宮炎及流產(chǎn)，人的肺炎，腦膜炎，腸子宮炎及流產(chǎn)，人的肺炎，腦膜炎，腸炎。炎。革蘭氏陰性需氧桿菌課件復(fù)習(xí)思考題復(fù)習(xí)思考題1 布氏桿菌有哪些種，其致病性如何？布氏桿菌有哪些種，其致病性如何？2 布氏桿菌病的微生物學(xué)診斷方法。布氏桿菌病的微生物學(xué)診斷方法。