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1、鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件鈣離子對心臟節(jié)律性的影響2012級臨床醫(yī)學(xué)級臨床醫(yī)學(xué)五五七七班班第第三三機(jī)能實驗室機(jī)能實驗室 第第3小組小組報告人鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件20125610714 李小芳20125610715 林佳佳20125610716 林麗鋒20125610718 劉世鴻20125610719 劉 穎20125610720 劉園夢20125610721 梅培圓專家專家組成員：鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件實驗大致流程：實驗?zāi)康膶嶒炘韺嶒瀸ο髮嶒炂鞑暮退幤穼嶒灢襟E和觀察項目預(yù)期結(jié)果結(jié)果分析注意事項鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件一、實驗?zāi)康模海?）探究不同鈣離子濃度對心臟節(jié)律性的影

2、響；（2）學(xué)習(xí)離體蛙心灌流的方法，了解離體器官的研究方法。鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件二、實驗原理 （1）心臟的正常節(jié)律性活動必須在適宜的理化環(huán)境下才能維持，一旦適宜的理化環(huán)境被干擾或破壞，心臟活動就會受到影響。節(jié)律性是指心肌細(xì)胞能在沒有外來刺激情況下具有自動發(fā)生節(jié)律性興奮的能力或特性。自律性的高低是指心肌細(xì)胞自動興奮頻率的高低。細(xì)胞外Ca2+濃度發(fā)生變化時與Ca2+內(nèi)流與Na+內(nèi)流相關(guān)的生物電活動都將受到影響。當(dāng)細(xì)胞外Ca2+濃度在一定范圍內(nèi)升高，細(xì)胞膜對Ca2+通透性升高，心室肌細(xì)胞平臺期Ca2+內(nèi)流增加心肌收縮增強(qiáng)增快；當(dāng)細(xì)胞外Ca2+濃度過高時，心臟就會停搏于收縮狀態(tài)，出現(xiàn)鈣僵直。（2

3、）用理化特性近似于蟾蜍血漿的任試液灌流離體的蟾蜍心臟，在一定時間內(nèi)可保持其節(jié)律性收縮和舒張。改變灌流液的組成成分，心臟跳動的頻率和幅度會隨之發(fā)生改變。鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件三、實驗對象：蟾蜍 鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件四、實驗器材和藥品 蛙類手術(shù)器械一套，生物信號采集系統(tǒng)，張力換能器，鐵支架，雙凹架，試管架，蛙心插管，蛙心夾，滴管，細(xì)線。任試液，含Ca2+的溶液，1:10000去甲腎上腺。鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件五、實驗步驟和觀察項目（一）、離體蛙心的制備 1、取蟾蜍一只，用探針到會腦和脊髓，將其仰臥固定在蛙板上。用鑷子夾起皮膚，然后將胸部劍突軟骨下方的皮膚剪出一個“V”字形切口，

4、暴露出劍突。用鑷子夾住劍突下端，在肌肉層上剪出“V”形切口。再用粗剪刀沿正中線剪開胸骨，并把左右兩側(cè)胸骨完全剪掉，眼科剪仔細(xì)剪開心包膜，暴露心臟。鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件3、結(jié)扎血管 在右主動脈下穿一根線并結(jié)扎，再在左右主動脈下穿一根線備用。用玻璃分針將心尖向上翻至背面，以備用線將前后腔靜脈一起結(jié)扎（注意勿結(jié)扎住靜脈竇）。將心臟回復(fù)至原位。2、仔細(xì)識別心房、心室、動脈圓錐、主動脈、靜脈竇、前后腔靜脈等。鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件4、蛙心插管 在左主動脈下穿一根線結(jié)扎左主動脈遠(yuǎn)心端，另一線備用。提起左主動脈遠(yuǎn)端縛線，用眼科剪在做主動脈上圓錐處剪一“V”形切口，將盛有少量任試液的蛙心插管由此

5、口插入主動脈，插至動脈圓錐時，略向后退，在心室收縮時，沿心室后壁方向下插，經(jīng)主動脈瓣插入心室腔內(nèi)（不可插入過深，以免心室壁堵住插管下口）。若插管成功進(jìn)入心室，管內(nèi)液體會隨著心室搏動而上下移動。用左主動脈近心端的備用線結(jié)扎插管，并將結(jié)扎線固定于插管側(cè)面的小突起上。鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件5、游離蛙心 提起插管，在結(jié)扎線遠(yuǎn)端分別剪斷主動脈左右分支；剪斷左右肺動脈和前后腔靜脈，將心臟離體。用滴管吸盡插管內(nèi)的余血，加入新鮮任試液反復(fù)沖洗數(shù)次，直至液體完全澄清。保持灌流液面高度恒定（12cm），即可進(jìn)行試驗。鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件6、儀器連接 用試管夾將制備好的離體蛙心固定于支架上，在心臟舒張

6、琪用蛙心夾夾住心尖部，并連接到張力換能器上（勿讓心臟受到過度牽拉）。將張力換能器的輸出線與生物信號采集系統(tǒng)相連。鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件（二）、觀察項目 1、描記正常心臟收縮曲線并分析：疏密：代表心跳的頻率，可根據(jù)顯速來計數(shù)。規(guī)律：代表心跳的節(jié)律性。幅度：代表心室收縮的強(qiáng)弱。頂點水平：代表心室收縮的程度。基線：代表心室舒張的程度。2、不同濃度Ca2+對心臟節(jié)律性的影響：吸出插管內(nèi)全部的任試液，分別換入配置好的（1/4、1/2、1、2、4、8）倍的Ca2+濃度的任試液。每次換入新的試劑前用任試液潤洗蟾蜍離體的心臟。鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件六、預(yù)期結(jié)果：當(dāng)細(xì)胞外Ca2+濃度在一定范圍內(nèi)升高

7、（1/4、1/2、1、2、4）倍Ca2+影響下，心跳加速，即心率會適當(dāng)加快，當(dāng)細(xì)胞外Ca2+濃度較高時8倍Ca2+，心臟會停止跳動，心肌出現(xiàn)鈣僵直。鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件七、結(jié)果分析：Ca2+是一種對心臟活動不可或缺的離子。在本次試驗中，我們使用不同濃度鈣離子任氏液對蛙心進(jìn)行離體灌流。當(dāng)肌細(xì)胞上有動作電位傳來時，肌漿網(wǎng)（即縱管系統(tǒng)）釋放Ca2+，引起肌漿中Ca2+濃度升高，作為Ca2+受體的肌鈣蛋白結(jié)合了足夠數(shù)量的Ca2+，就引起肌鈣蛋白分子構(gòu)想的某些改變，傳遞給原肌凝蛋白，是后者的構(gòu)象也發(fā)生改變，結(jié)果是原肌凝蛋白的雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生某種扭轉(zhuǎn)，把安靜時阻止肌纖蛋白和橫橋相互結(jié)合的阻礙因素出去

8、，出現(xiàn)兩者的結(jié)合。鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件 在橫橋和肌纖蛋白的結(jié)合、扭動、解離等過程中，細(xì)肌絲不斷向暗帶中央移動，使肌肉收縮。因此，當(dāng)任氏液中鈣離子的濃度增高時，也能使肌鈣蛋白結(jié)合更多的Ca2+，從而增強(qiáng)心肌的收縮作用。細(xì)胞外 Ca2+在心肌細(xì)胞膜上對 Na+的內(nèi)流有競爭性的抑制作用，稱為膜屏障作用。因此，細(xì)胞外Ca2+濃度發(fā)生變化時，與Na+的內(nèi)流和Ca2+的內(nèi)流相關(guān)的電活動都將受到影響，而對靜息電位則無明顯作用。鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件 當(dāng)細(xì)胞外 Ca2+濃度時，對 Na+的屏障作用，由于這種抑制作用，觸發(fā) Na+快速內(nèi)流產(chǎn) 生0 期去極化就比較困難，即TP 上移，從而與RP 的差距增大，興奮性降低;發(fā)生興奮后，Na+內(nèi)流的抑制則導(dǎo)致0 期去極化速度和幅度降低，傳導(dǎo)性下降。Ca2+內(nèi)流是慢反應(yīng)細(xì)胞0 期去極化和快反應(yīng)細(xì)胞2 期的主要離子活動。當(dāng)細(xì)胞外Ca2+濃度，使Ca2+內(nèi)流加快，慢反應(yīng)細(xì)胞0 期去極化加快加強(qiáng)，傳導(dǎo)性升高。細(xì)胞膜對 Ca2+的通透性升高，心室肌細(xì)胞平臺期 Ca2+內(nèi)流增加，心肌收縮力增強(qiáng)增快;當(dāng)細(xì)胞外Ca2+濃度過高時，心臟將停搏于收縮狀態(tài)，稱為鈣僵直。鈣離子對心臟節(jié)律性的影響課件謝謝觀賞Make Presentation much more fun