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1、
全自動(dòng)還原糖測定儀說明書
山東省科學(xué)院生物中心
地 址:中國·濟(jì)南市科院路19號
電 話:(0531)82605742 82605322
傳 真:(0531)82965634
郵 編:250014
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感謝您選用由山東省科學(xué)院生物中心研制、獲得國家發(fā)明專利的“全自動(dòng)還原糖測定儀”。
本技術(shù)是根據(jù)費(fèi)林試劑測定原理設(shè)計(jì)而成的全自動(dòng)測定儀。測定的各種條件由計(jì)算機(jī)控制,操作者只需用移液器將微量樣品注入反應(yīng)池即可全自動(dòng)完成測定過程,自動(dòng)顯示和打印結(jié)果,操作簡單
2、,使用方便,測定周期短,準(zhǔn)確度高。
一、基本原理
斐林試劑是一種氧化劑,由甲、乙液組成。測定時(shí)一定量的甲、乙液混合,首先形成氫氧化銅,然后形成酒石酸鉀銅絡(luò)合物。次甲基藍(lán)作為滴定終點(diǎn)指示劑,在氧化溶液中呈藍(lán)色,被還原后呈無色。用標(biāo)準(zhǔn)還原糖滴定時(shí),還原糖首先使銅還原,至銅被還原完畢,糖才使次甲基藍(lán)還原成無色,即為滴定終點(diǎn)。
在滴定過程中,溶液顏色逐漸變化:藍(lán)色→深藍(lán)色→淺藍(lán)色→
紫紅色→淡紫紅色→在終點(diǎn)時(shí)突然變化至無色透明。
用特定波長的光電轉(zhuǎn)換裝置,檢測滴定過程中透光率的變化(見圖1)。根據(jù)電壓變化曲線由儀器控制系統(tǒng)自動(dòng)記錄、采樣、確定滴定終點(diǎn)。根據(jù)終點(diǎn)時(shí)消耗標(biāo)準(zhǔn)還原糖的量,由控制系統(tǒng)
3、自動(dòng)計(jì)算出樣品中的還原糖含量,并顯示和打印結(jié)果。
滴定過程的電信號變化及控制原理如下:
圖2、自動(dòng)控制系統(tǒng)
二、儀器結(jié)構(gòu)
儀器由反應(yīng)系統(tǒng)、自動(dòng)控制系統(tǒng)和機(jī)殼三部分組成。
加熱 進(jìn)樣 滴定
清洗
溫度傳感器
4、
光源 光電轉(zhuǎn)換
試劑 排空
攪拌電機(jī)
圖3、反應(yīng)池結(jié)構(gòu)圖
滴定反應(yīng)系統(tǒng)由滴定池主體構(gòu)成;滴定池左右兩側(cè)有入射光源和光電轉(zhuǎn)換器,滴定池前后兩側(cè)有液體進(jìn)出管道,滴定池內(nèi)側(cè)有溫度傳感器和液體加熱電極,根據(jù)需要調(diào)整液體溫度;滴定池底部有電磁攪拌器,使滴定液體均勻混合;上部是進(jìn)樣口,可用微量注射器將被測樣品注入滴定池(圖3)。柱塞泵自動(dòng)加入標(biāo)準(zhǔn)液、滴定
5、液、兩個(gè)蠕動(dòng)泵(圖4)可自動(dòng)完成清洗和排空。
自動(dòng)控制系統(tǒng)包括電源電路、控制電路、控制面板、微型打印機(jī),按設(shè)定程序控制滴定池液體的進(jìn)出、液體溫度、攪拌、光電反應(yīng)信息的收集和轉(zhuǎn)換、計(jì)算、測定結(jié)果顯示及打印。
雙柱塞泵 彈簧 泵頭 凹型模塊 泵管 單柱塞泵
蠕動(dòng)泵1 蠕動(dòng)泵2
6、 圖4、泵系統(tǒng)
三、操作步驟
(一)參數(shù)設(shè)置
1、 模式選擇:主程序?yàn)榈味ㄟ^程中電壓信號由低到高變化,模式燈亮;按模式健后,模式燈滅,滴定過程電壓信號由高到低變化。
2、 參數(shù)意義:
F0-----排空泵(1)(默認(rèn)值為22秒),設(shè)定排空泵轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)間。
F1-----排空泵(1)+ 清洗泵(2秒)(默認(rèn)值為 4),設(shè)定排空泵、清洗泵轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)間 。
F2-----清洗泵(2)(默認(rèn)值為9秒),設(shè)定清洗泵轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)間。
F3-----試劑泵(3)(默認(rèn)值為40秒),設(shè)定試劑泵轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)間。
F4----
7、-泵3復(fù)位時(shí)間(默認(rèn)值為48秒)。
F5-----泵4預(yù)推時(shí)間(默認(rèn)值為8秒)。
F6-----泵4復(fù)位時(shí)間(默認(rèn)值為99秒)。
F7-----時(shí)鐘(暫時(shí)不用)。
F8-----G1值(默認(rèn)值為0),測定樣品的線形范圍。
F9-----G2值(默認(rèn)值為10),測定樣品的線形范圍
FA----采樣電壓,根據(jù)不同的樣品選擇(默認(rèn)值為3)。
FB----連續(xù)測定次數(shù)(默認(rèn)值為10次)。
(二)操作步驟
1 插上電源,打開后蓋上的開關(guān),屏幕上顯示出 0000.
2 重復(fù)按壓[功能]鍵進(jìn)行各參數(shù)值設(shè)定(如不輸入?yún)?shù)值,各參數(shù)值
8、則為儀器的初始默認(rèn)值),按[輸入]鍵完成參數(shù)輸入。
3 按[開關(guān)]鍵,啟動(dòng)程序,儀器自動(dòng)進(jìn)入穩(wěn)定程序及定標(biāo),T1值的確定。
4 微型打印機(jī)打印出T1值之后進(jìn)行T2值的標(biāo)定。待進(jìn)樣指示燈亮?xí)r,用移液器吸取500微升定標(biāo)用標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖(1%)溶液注入反應(yīng)池進(jìn)行定標(biāo),反應(yīng)完成后儀器打印定標(biāo)T2值。
5 定標(biāo)完成后,自動(dòng)進(jìn)入測定程序。用取液器吸取500微升待測液, 待進(jìn)樣指示燈亮?xí)r將待測液注入反應(yīng)池,反應(yīng)結(jié)束后儀器自動(dòng)打印測定結(jié)果。
6 反應(yīng)結(jié)束后蠕動(dòng)泵1和蠕動(dòng)泵2動(dòng)作,排空、清洗,完成一個(gè)樣品測定程序自動(dòng)進(jìn)入下一個(gè)測定循環(huán)。
9、
7 按照測定次數(shù)設(shè)定值完成一個(gè)測定周期后,直接按[測定]鍵,進(jìn)入下一個(gè)測定循環(huán)。
8 測定過程中如果需要暫停,可在顯示屏數(shù)字閃爍時(shí)按下[測定]鍵,該反應(yīng)完成后,自動(dòng)停機(jī);再次測定只需按下[開關(guān)]鍵,繼續(xù)測定,無需重新定標(biāo)。
9 測定結(jié)束后,關(guān)掉電源即可關(guān)機(jī)。
(三)復(fù)位設(shè)置
進(jìn)樣器內(nèi)有較大氣泡時(shí)進(jìn)行復(fù)位操作。甲、乙液泵按復(fù)位Ⅰ實(shí)現(xiàn)復(fù)位,卸下進(jìn)樣器手工排出氣泡;標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖泵按復(fù)位Ⅱ?qū)崿F(xiàn)復(fù)位,卸下進(jìn)樣器手工排出氣泡。
(四)標(biāo)準(zhǔn)試劑:
1、 斐林甲液:硫酸銅(CuSO4?5H2O)35.0g,1%次甲基藍(lán)溶液5.0ml,共溶后定容至1000ml。
2、
10、 斐林乙液:氫氧化鈉(NaOH)126.4g,酒石酸鉀鈉(C4H4O6KNa?4H2O)117.0g,亞鐵氰化鉀(K4F4(CN)6?3H2O)9.4g,以水共溶后定容至1000ml。
3、 100g/L標(biāo)準(zhǔn)無水葡萄糖(C6H12O6)溶液。
以上試劑按比例調(diào)配后使用。
(五)試劑準(zhǔn)備
1 甲液:將標(biāo)準(zhǔn)試劑中的費(fèi)林甲液按(1:2)稀釋即可。
2 乙液:將標(biāo)準(zhǔn)試劑中的費(fèi)林乙液按(1:1)稀釋即可。
3 1%標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液:準(zhǔn)確稱取5.000g烘干葡萄糖,溶解并加入2.5 ml鹽酸,定容至500ml。
4 100g/L標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液:精確稱取100.0g分析純無水葡萄糖,
11、加蒸餾水溶解,并加10ml分析純鹽酸,定容1000ml,備用。
5 0.5%標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液:吸取上述10%標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液
50ml,加水稀釋定容至1000ml。
6 參照上條配制0.2%、0.4%、3%、5%等標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液。
7 根據(jù)待測液濃度范圍,可選定費(fèi)林甲乙液的稀釋比例。
(六)泵管聯(lián)接
1 蠕動(dòng)泵1左端口接蒸餾水瓶。
2 蠕動(dòng)泵2右端口接廢液瓶。
3 雙柱塞泵端入口分別接甲乙液試劑瓶。
4 單柱塞泵端入口接滴定糖瓶。
(七)注意事項(xiàng)
1 儀器使用穩(wěn)壓電源。
2 儀器使用兩周后反應(yīng)池要清洗,用清洗液浸泡二分鐘,
12、再
用注射器排出。
3 謹(jǐn)防反應(yīng)液濺出。
4 反應(yīng)池裝好后請勿轉(zhuǎn)動(dòng),謹(jǐn)防漏液。
5 正確使用移液器。
特別注意:經(jīng)常檢查試劑瓶,及時(shí)添加試劑以免管道進(jìn)入
氣泡,影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確度。
附:
裝機(jī)清單:
1 還原糖測定儀一臺
2 備用管道一套
3 微量進(jìn)樣器一個(gè)
4 使用說明書一本
儀器如有改型,恕不另外通知
四、問題及處理措施
出 現(xiàn) 問 題
檢 查 項(xiàng) 目
處 理 措 施
開機(jī)無反應(yīng)
檢查電源線、保險(xiǎn)管
連接好電源線,保持保險(xiǎn)管完好。
反應(yīng)池加熱不停
檢查溫度控制器、反應(yīng)池右耳
連接好溫度控
13、制器插頭、反應(yīng)池右耳旋緊
反應(yīng)時(shí)間顯示為99秒
檢查甲乙液、注射器、連接管道
保持試劑瓶液面高度,注射器、管道內(nèi)無氣泡、破損
測定值漂移
檢查注射器、連接管道,攪拌轉(zhuǎn)子、光源
保持注射器、連接管道無氣泡、破損,攪拌轉(zhuǎn)子、光源工作正常。
打印機(jī)不走紙
檢查打印機(jī)、打印紙
更換打印紙
如遇其他問題,請與本中心技術(shù)人員聯(lián)系
五、主要性能指標(biāo):
1、電源:220V 50Hz
2、主機(jī)大?。?85×390×20cm(L×W×H)
3、重量:22.5Kg
4、靈敏度:0.01 % RG
5、線形范圍:0 — 1.0% RG (可根據(jù)需要設(shè)定)
6、測定周期:< 4分鐘
7、抗干擾能力強(qiáng),不受樣品顏色和濁度的影響, 適合于發(fā)酵液、
糖化液;
8、測定成本低,試劑消耗量低于常規(guī)方法;
9、操作簡單,用微量移液器將被測樣品注入反應(yīng)池就可全自動(dòng)完成;
10、測定原理與目前國家標(biāo)準(zhǔn)一致, 不需特殊材料和試劑,各生
產(chǎn)廠家可直接應(yīng)用。
六、面板